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| BjαIT的表达、抗血清制备及scFv基因库的构建 | |
| 引用本文： | 李洪波,夏玉先.BjαIT的表达、抗血清制备及scFv基因库的构建[J].生物学杂志,2009,26(4):1-4. |
| 作者姓名： | 李洪波 夏玉先 |
| 作者单位： | 重庆大学生物工程学院基因工程研究中心,重庆市杀虫真菌工程技术研究中心,重庆,400030 |
| 基金项目： | 国家"11.5""863"课题"细菌、真菌类生物杀虫剂的研究和创制" |
| 摘 要： | 根据成熟昆虫神经毒素BjαIT的氨基酸序列，人工合成毒素基因，并克隆至大肠杆菌表达载体pPET-30a（＋）。在IPTG的诱导下，神经毒素在大肠杆菌中融合表达，表达产物经镍亲和层析纯化，纯化蛋白免疫BALB／c小鼠，制备了特异性较高的抗血清，抗体滴度达1：512，000。提取免疫小鼠脾细胞总RNA，通过RT-PCR分别扩增重链可变区（VH）及轻链可变区（VL）基因片段，在连接肽linker的连接下成功构建了包含抗BjαIT的全长scFv基因库。本研究为新型蝎昆虫神经毒素BjαIT的检测奠定了基础。 |
| 关 键 词： | BjαIT 抗血清 scFv |
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