TALENs介导MSTN基因突变山羊的制备及性能分析 |
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引用本文: | 宋绍征,何正义,成勇,于宝利,张婷,李丹.TALENs介导MSTN基因突变山羊的制备及性能分析[J].遗传,2022(6):531-542. |
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作者姓名: | 宋绍征 何正义 成勇 于宝利 张婷 李丹 |
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作者单位: | 1. 无锡太湖学院健康与护理学院基础医学系;2. 赣南医学院第一附属医院临床医学研究中心;3. 扬州大学兽医学院江苏省转基因动物制药工程研究中心 |
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基金项目: | 国家转基因生物新品种培育重大专项(编号:2014ZX08008-004);;江苏省高校“青蓝工程”优秀青年骨干教师项目(编号:苏教师函[2021]-11号);;江苏省高校自然科学基金面上项目(编号:19KJB180030); |
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摘 要: | 肌肉生长抑制素(myostatin, MSTN)是一种骨骼肌生长发育的负调控因子,可以抑制成肌细胞的增殖,是动物品种改良的重要候选基因,该基因突变能够引起骨骼肌的广泛性增生与肥大,产生“双肌”症状,导致动物脂肪分化减少、肌肉含量增加,从而满足市场动物肉品质消费的需求。为了获得“双肌”表型的MSTN基因突变克隆山羊,本研究在山羊MSTN基因第一外显子序列设计并构建TALENs表达载体,转染山羊胎儿成纤维细胞,经嘌呤霉素筛选获得抗性细胞株,通过PCR检测和基因测序筛选MSTN基因突变细胞株作为供核细胞进行山羊体细胞核移植,并鉴定MSTN基因突变类型;通过组织切片分析MSTN基因突变山羊肌肉组织形态结构,监测不同月龄克隆山羊体重并分析其不同生长发育阶段的体重增长趋势。结果表明,共获得109株MSTN基因突变细胞株,突变效率达到79.0%(109/138),其中46株为双等位基因突变,占细胞株总数的33.3%(46/138)。选取4株生长状态较好的MSTN基因突变细胞株(1株为双等位基因纯合突变,3株为非纯合突变)进行体细胞核移植至12只受体山羊,30d时B超检查出受孕母羊4只,受孕率为33....
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关 键 词: | 肌肉生长抑制素 基因突变 山羊 TALENs 体细胞核移植 |
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