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一个可能与T细胞发育相关的新的C2H2型锌指蛋白基因的克隆(英)
引用本文:杜占文,张昕,张俊武.一个可能与T细胞发育相关的新的C2H2型锌指蛋白基因的克隆(英)[J].生物化学与生物物理进展,2004,31(7):600-605.
作者姓名:杜占文  张昕  张俊武
作者单位:中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所,医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005
基金项目:国家重大基础研究前期研究专项(2002CCA04300), 国家高技术“863”计划(2002AA223071)和高等学校博士学科点专项科研基金资助项目.
摘    要:一些在组织和细胞分化中起重要作用的蛋白质包含锌指结构域.为了克隆分离和研究与造血细胞分化和发育成熟相关的蛋白基因,利用编码C2H2型锌指蛋白结构域中部分保守氨基酸序列设计简并引物,以骨髓cDNA为模板,进行PCR扩增,得到若干新的锌指蛋白基因EST.用其中一条为探针筛选人骨髓cDNA文库,获得了一个新的锌指蛋白基因全长cDNA,GenBank收录号为AF246126,长3 888 bp,包括一个完整阅读框,编码686个氨基酸,包括17个典型的和2个非典型的C2H2模体,命名为HZF2. RNA印迹、人多组织mRNA斑点杂交分析结果显示, 其在T淋巴细胞发育和定居的器官组织胸腺、淋巴结中有较高表达,在脾脏、胎肝有中度表达,在B淋巴细胞发育的骨髓中表达很低,在外周血几个淋巴细胞系中仅有极微量的表达,提示HZF2可能对于T淋巴细胞发育和增殖有重要功能.该基因也在脑组织的若干部位、胎盘及肾上腺有较高表达,在多种其他组织细胞有微量表达,说明其可能对维持这些组织细胞的生理功能也起一定作用.将编码HZF2读框的DNA顺序克隆到pEGFP-N1载体中,转染3T3细胞,证明表达的HZF2-GFP融合蛋白定位于细胞核,这与根据HZF2蛋白结构推测其可能作为DNA结合蛋白行使调节基因转录的功能是一致的.

关 键 词:锌指蛋白,基因克隆,cDNA文库筛选,表达谱,T细胞发育
收稿时间:2004/1/12 0:00:00
修稿时间:2004/3/30 0:00:00

Cloning and Characterization of a New Gene Encoding C2H2 Zinc Finger Protein Which May Play an Important Role in T Lymphocyte Development
DU Zhan-Wen,ZHANG Xin and ZHANG Jun-Wu.Cloning and Characterization of a New Gene Encoding C2H2 Zinc Finger Protein Which May Play an Important Role in T Lymphocyte Development[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2004,31(7):600-605.
Authors:DU Zhan-Wen  ZHANG Xin and ZHANG Jun-Wu
Institution:National Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing 100005, China;National Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing 100005, China;National Laboratory of Medical Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing 100005, China
Abstract:
Keywords:zinc finger protein  cDNA library screening  expression spectrum  T cell development
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