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| 产甘油假丝酵母胞浆3-磷酸甘油脱氢酶编码基因的克隆 | |
| 作者姓名： | 王正祥 诸葛健 |
| 作者单位： | 无锡轻工大学生物工程学院遗传育种研究室 |
| 摘 要： | 当酵母细胞处于高渗压环境时，甘油被诱导合成以提高其胞内渗透压，这一过程受ＨＯＧ途径的调控。ＧＰＤ１基因为ＨＯＧ途径的重要靶基因，高效表达使胞内３磷酸甘油脱氢酶酶活水平提高可极大地提高甘油的产量。本研究将产甘油假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａｇｌｙｃｅｒｏｌｏｇｅｎｅｓｉｓ）染色体ＤＮＡ经Ｓａｕ３ＡＩ部分酶解后的５～１０ｋｂＤＮＡ片段与经ＢａｍＨＩ线性化及ＣＩＰ处理过的酵母大肠杆菌穿梭质粒ＹＥｐ５１连接，以大肠杆菌ＤＨ５α为受体，构建产甘油假丝酵母的染色体基因文库。通过遗传互补法，在含５０ｇ／Ｌ氯化钠的培养基上筛选出１５个转化子，对转化子０６０１进行了进一步鉴定，转化子０６０１所含质粒ＹＥｐ０６０１带有ＹＥｐ５１的标记并可以消除Ｓａｃｃｂａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ６４２菌株由于其ＧＰＤ１，ＧＰＤ２两基因的缺失突变而表现出的渗透压敏感性，表明已克隆到产甘油假丝酵母的编码胞浆３磷酸甘油脱氢酶的基因 |
| 关 键 词： | 产甘油假丝酵母 3-磷酸甘油脱氢酶基因 克隆 |
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