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14-3-3参与apelin-13促进大鼠血管平滑肌细胞增殖ERK1/2信号途径研究
引用本文:潘伟男,李 峰,毛小环,秦旭平,邓水秀,封 芬,陈 锋,李兰芳,廖端芳,陈临溪.14-3-3参与apelin-13促进大鼠血管平滑肌细胞增殖ERK1/2信号途径研究[J].生物化学与生物物理进展,2011,38(12):1153-1161.
作者姓名:潘伟男  李 峰  毛小环  秦旭平  邓水秀  封 芬  陈 锋  李兰芳  廖端芳  陈临溪
作者单位:南华大学药物药理研究所湖南省高等学校药物蛋白质组学重点实验室湖南省动脉硬化学重点实验室;湖南省食品药品职业学院;湖南中医药大学;湖南省环境生物职业技术学院;
基金项目:国家自然科学基金(03091577), 衡阳市科技局(2009KJ14), 教育部留学回国人员科研项目启动基金(20091590)和湖南省高校科技创新团队支持计划资助项目
摘    要:本室以前已经报道了G蛋白偶联受体APJ的内源性配体多肽,apelin-13,通过激活ERK1/2促进大鼠血管平滑肌细胞增殖.本文研究14-3-3信号蛋白是否参与apelin-13促进大鼠血管平滑肌细胞增殖ERK1/2信号途径,探讨apelin/APJ系统的细胞信号转导机制.组织贴块法培养大鼠胸主动脉VSMCs;Western blotting方法检测14-3-3、pRaf-1、Raf-1、pERK1/2、ERK1/2、cyclinD1、cyclinE的表达;MTT方法观察14-3-3抑制剂Difopein对VSMCs的增殖作用;免疫共沉淀方法检测14-3-3和Raf-1蛋白复合物的形成.Western blotting方法结果显示,apelin-13(0、0.5、1、2、4μmol/L)浓度依赖性刺激大鼠VSMCs 14-3-3表达、Raf-1和ERK1/2磷酸化,以2μmol/L最为明显;2μmol/L apelin-13时间依赖性刺激大鼠VSMCs 14-3-3表达、Raf-1和ERK1/2磷酸化,在4 h增加最为显著;14-3-3蛋白抑制剂Difopein明显抑制apelin-13诱导的Raf-1磷酸化、ERK1/2磷酸化、cyclinD1及cyclinE表达;免疫共沉淀方法发现apelin-13诱导14-3-3与Raf-1结合增加,而Difopein明显抑制两者结合;MTT法显示Difopein明显抑制apelin-13诱导的血管平滑肌细胞增殖.上述结果表明,Apelin-13通过14-3-3/Raf-1复合物-ERK1/2信号转导通路促进大鼠血管平滑肌细胞增殖.

关 键 词:apelin  APJ  14-3-3  血管平滑肌细胞  ERK1/2  Raf-1
收稿时间:2011/7/19 0:00:00
修稿时间:2011/10/22 0:00:00

14-3-3 Is Involved in ERK1/2 Signaling Pathway of Rat Vascular Smooth Muscle Cells Proliferation Induced by Apelin-13
PAN Wei-Nan,LI Feng,MAO Xiao-Huan,QIN Xu-Ping,DENG Shui-Xiu,FENG Fen,CHEN Feng,LI Lan-Fang,LIAO Duan-Fang and CHEN Lin-Xi.14-3-3 Is Involved in ERK1/2 Signaling Pathway of Rat Vascular Smooth Muscle Cells Proliferation Induced by Apelin-13[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2011,38(12):1153-1161.
Authors:PAN Wei-Nan  LI Feng  MAO Xiao-Huan  QIN Xu-Ping  DENG Shui-Xiu  FENG Fen  CHEN Feng  LI Lan-Fang  LIAO Duan-Fang and CHEN Lin-Xi
Institution:PAN Wei-Nan1,2),LI Feng1,3),MAO Xiao-Huan1,4),QIN Xu-Ping1),DENG Shui-Xiu1,FENG Fen1),CHEN Feng1),LI Lan-Fang1),LIAO Duan-Fang3),CHEN Lin-Xi1) (1) Institute of Pharmacy and Pharmacology,Learning Key Laboratory for Pharmacoproteomics,Key Laboratory for Arteriosclerology of Hunan Province,University of South China,Hengyang 421001,China,2) Hunan Food and Drug Voctional College,Changsha 410014,3) Department of Physiology,Hunan College of Traditional Chinese Medicine,Changsha 410208,4) Hunan Envir...
Abstract:Previously,we found that G protein-coupled receptor APJ endogenous ligand apelin-13 stimulates vascular smooth muscle cells(VSMC) proliferation mediated in part by PKC-PI3K-ERK1/2-cyclinD1 signaling cascades.In this study,Raf-1-14-3-3 signaling in rat VSMCs proliferation stimulated by apelin-13 was further investigated.Cell proliferation was measured with MTT assay.Expression of PI3K,phospho-PI3K,Raf-1,phospho-Raf-1,ERK1/2,phospho-ERK1/2,cyclinD1 and cyclinE were detected byWestern blotting.14-3-3 protein c...
Keywords:apelin  APJ  14-3-3  cyclin  ERK1/2  Raf-1  vascular smooth muscle cells
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