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表达犬细小病毒VP2蛋白重组犬2型腺病毒的构建及鉴定
引用本文:谢之景,夏咸柱,扈荣良,杨松涛,邹啸环,黄耕.表达犬细小病毒VP2蛋白重组犬2型腺病毒的构建及鉴定[J].病毒学报,2006,22(3):214-219.
作者姓名:谢之景  夏咸柱  扈荣良  杨松涛  邹啸环  黄耕
作者单位:解放军军事医学科学院,军事兽医研究所,长春,130062;山东农业大学,动物科技学院,泰安,271018;解放军军事医学科学院,军事兽医研究所,长春,130062
基金项目:全军“十五”医药卫生重点基金课题(01-Z-092)
摘    要:对CAV-2的E3区的Ssp I片段进行缺失构建了E3区缺失载体pVAXΔE3,然后将CPV VP2表达盒连接到pVAXΔE3的E3区缺失处,构建了CPV VP2表达盒的转移载体pΔECPV-VP2,用SalI NruI分别对pPoly2-CAV2和pΔECPV-VP2进行双酶切,分别进行琼脂糖凝胶电泳回收目的片段,将含CPV VP2表达盒的SalI NruI片段定向克隆入pPoly2-CAV-2载体,获得了含CPV VP2表达盒重组CAV-2基因组的质粒pCAV-2/CPV-VP2。用AscI ClaI对pCAV-2/CPV-VP2进行双酶切,释放CAV-2/CPV-VP2重组基因组,将CAV-2/CPV-VP2基因组与去除SalI NruI片段的CAV-2基因组的两个片段混合,利用脂质体介导共转染DK细胞,出现病变,获得重组病毒CAV-2/CPV。并且,从形态学、基因组水平、目的基因的转录及重组病毒的生长特征等方面进行了鉴定。结果证明,CAV-2/CPV具有典型的CAV-2形态特征,CAV-2/CPV在繁殖的过程中没有对CPV VP2表达盒片段进行缺失或重排,并且能够转录CPV VP2的mRNA。CAV-2/CPV的繁殖速度比野生型CAV-2的繁殖速度慢。

关 键 词:犬细小病毒  VP2基因  犬腺病毒
文章编号:1000-8721(2006)03-0214-06
收稿时间:2005-07-06
修稿时间:2005-07-062005-08-26

Construction and Identification of a Recombinant Canine Type 2 Adenovirus Expressing VP2 Protein of Canine Parvovirus
XIE Zhi-jing,XIA Xian-zhu,HU Rong-liang,YANG Song-tao,ZOU Xiao-huan,HUANG Geng.Construction and Identification of a Recombinant Canine Type 2 Adenovirus Expressing VP2 Protein of Canine Parvovirus[J].Chinese Journal of Virology,2006,22(3):214-219.
Authors:XIE Zhi-jing  XIA Xian-zhu  HU Rong-liang  YANG Song-tao  ZOU Xiao-huan  HUANG Geng
Institution:1. The Military Veterinary Institute, Academy of Military Medicine of PLA , Changchun 130062, China ; 2. College of Animal Science and Technique, Shandong Agricultural University, Taian 271018, China
Abstract:
Keywords:canine parvovirus(CPV)  VP2 gene  canine adenovirus(CAV)
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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