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利用条件基因沉默系统研究CHIP对TGF-β信号通路的调控
引用本文:商瑜,徐夏莲,辛 宏,常智杰.利用条件基因沉默系统研究CHIP对TGF-β信号通路的调控[J].生物化学与生物物理进展,2009,36(7):823-829.
作者姓名:商瑜  徐夏莲  辛 宏  常智杰
作者单位:清华大学医学院,清华大学生物科学与技术系,生物膜与膜生物工程国家重点实验室,北京,100084
基金项目:清华大学裕元基金项目(20240005-06)和国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(2006CB910102, 2002CB513007)
摘    要:根据条件基因敲除技术和基因沉默的理论,构建了可被CRE操控的条件基因沉默系统,并应用其研究分子伴侣相互作用蛋白CHIP(C-terminus of Hsc70-interacting protein)对TGF-β信号通路的调控.RT-PCR和免疫印迹结果显示,pLoxP/CHIPi与CRE相互作用后,可以有效地降低内源CHIP的mRNA水平,减少外源和内源CHIP的蛋白质量.荧光素酶报告系统分析表明,条件基因沉默能解除CHIP对TGF-β信号通路的抑制性调控,增强TGF-β信号通路的转录活性.结果表明,CRE依赖的条件基因沉默系统具有高效性、特异性,并通过它反向验证了CHIP对TGF-β信号通路的抑制性调控,为进一步研究与CHIP相关的TGF-β信号通路所致疾病的发生机理提供了有效工具.

关 键 词:条件基因沉默  TGF-β  抑制性调控
收稿时间:2008/11/13 0:00:00
修稿时间:2009/1/20 0:00:00
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