利用条件基因沉默系统研究CHIP对TGF-β信号通路的调控 |
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引用本文: | 商瑜,徐夏莲,辛 宏,常智杰.利用条件基因沉默系统研究CHIP对TGF-β信号通路的调控[J].生物化学与生物物理进展,2009,36(7):823-829. |
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作者姓名: | 商瑜 徐夏莲 辛 宏 常智杰 |
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作者单位: | 清华大学医学院,清华大学生物科学与技术系,生物膜与膜生物工程国家重点实验室,北京,100084 |
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基金项目: | 清华大学裕元基金项目(20240005-06)和国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(2006CB910102, 2002CB513007) |
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摘 要: | 根据条件基因敲除技术和基因沉默的理论,构建了可被CRE操控的条件基因沉默系统,并应用其研究分子伴侣相互作用蛋白CHIP(C-terminus of Hsc70-interacting protein)对TGF-β信号通路的调控.RT-PCR和免疫印迹结果显示,pLoxP/CHIPi与CRE相互作用后,可以有效地降低内源CHIP的mRNA水平,减少外源和内源CHIP的蛋白质量.荧光素酶报告系统分析表明,条件基因沉默能解除CHIP对TGF-β信号通路的抑制性调控,增强TGF-β信号通路的转录活性.结果表明,CRE依赖的条件基因沉默系统具有高效性、特异性,并通过它反向验证了CHIP对TGF-β信号通路的抑制性调控,为进一步研究与CHIP相关的TGF-β信号通路所致疾病的发生机理提供了有效工具.
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关 键 词: | 条件基因沉默 TGF-β 抑制性调控 |
收稿时间: | 2008/11/13 0:00:00 |
修稿时间: | 2009/1/20 0:00:00 |
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