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| 一个高效表达,快速纯化大肠杆菌精氨酰—tRNA合成酶的 … | |
| 引用本文： | 刘文,王恩多.一个高效表达,快速纯化大肠杆菌精氨酰—tRNA合成酶的 …[J].生物化学与生物物理学报,1999,31(5):494-498. |
| 作者姓名： | 刘文 王恩多 |
| 作者单位： | [1]中国科学院上海生物化学研究所,分子生物学国家重点实验室 [2]中国科学院上海生物化学研究所,分子生物学国家重点 |
| 摘 要： | 编码大肠杆菌精氨酸－ｔＲＮＡ合成酶的基因ａｒｇＳ被克隆到ｐＭＦＴ７－５载体上。将此质粒转化的大肠 力ＪＭ１０９（ＤＥ３）中，该转化子粗抽液的比活是宿主菌的２５００倍。通过ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－６Ｂ ＦａｓｔＦｌｏｗ和ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－６Ｂ两步柱层析在一天内即可将精氨酰－ｔＲＮＡ合成酶纯化至电泳一条带，比活为３６０００ｕ／ｍｇ，总收率可达６９％。 |
| 关 键 词： | 大肠杆菌 精氨酰－tRNA 合成酶 高表达 纯化 |
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