共表达构建呈现人白细胞介素-13抗原肽的Qβ噬菌体病毒样颗粒 |
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引用本文: | 白红妹,黄惟巍,刘存宝,孙文佳,杨旭,马雁冰.共表达构建呈现人白细胞介素-13抗原肽的Qβ噬菌体病毒样颗粒[J].中国生物工程杂志,2018,38(5):66-72. |
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作者姓名: | 白红妹 黄惟巍 刘存宝 孙文佳 杨旭 马雁冰 |
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作者单位: | 中国医学科学院/北京协和医学院 医学生物学研究所 昆明 650118 |
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基金项目: | * 云南省应用基础研究计划重点项目(2016FA049);国家自然科学基金面上项目资助项目(81773270) |
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摘 要: | 目的:构建呈现人白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)抗原肽的Qβ噬菌体病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)疫苗。方法:将人IL-13抗原肽经基因重组插入Qβ噬菌体衣壳蛋白(CP)的C端。在BL21细菌中,经IPTG诱导CP及C端接有IL-13抗原肽的CP(CP/IL-13)同时表达。以硫酸铵沉淀及蔗糖密度梯度离心进行VLPs纯化及分析嵌合VLPs的存在,以HPLC分析VLPs纯度,以电镜观察颗粒形态。小鼠经皮下免疫VLPs后采集血清,以ELISA检测人IL-13特异性Ig G抗体水平。结果:重组蛋白CP与CP/IL-13获得成功表达,两者在密度梯度离心中有一致的、与QβVLPs相同的沉降行为,而CP/IL-13单独无Qβ颗粒行为。经纯化获得了高纯度颗粒,嵌合颗粒与Qβ颗粒形态相似。此外,该VLPs疫苗诱导小鼠产生了IL-13特异的抗体应答。结论:利用共表达策略可成功构建呈现人IL-13抗原表位的嵌合VLPs,为以主动免疫方式调控IL-13在疾病中的病理作用,提供了具有临床应用潜能的疫苗形式。
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关 键 词: | 白细胞介素-13 病毒样颗粒 疫苗 |
收稿时间: | 2018-01-14 |
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