| 三疣梭子蟹C型溶菌酶在毕赤酵母中的表达及其抑菌活性 |
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| 引用本文： | 王强厚,陶妍,崔旭,颜倩倩,张亚莉.三疣梭子蟹C型溶菌酶在毕赤酵母中的表达及其抑菌活性[J].生物技术通报,2018(10). |
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| 作者姓名： | 王强厚 陶妍 崔旭 颜倩倩 张亚莉 |
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| 作者单位： | （上海海洋大学食品学院;陕西省微生物研究所分子生...;（中国热带农业科学院橡胶...;四川理工学院生物工程学院...;青岛大学;;天津;南京师范大学生命科学学院...;武汉;北京林业大学生物科学与技...;济宁医学院基础医学院;;（武汉轻工大学食品科学与... |
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| 基金项目： | 陕西省微生物研究所分子生...;（中国热带农业科学院橡胶...;四川理工学院生物工程学院...;青岛大学;;天津;南京师范大学生命科学学院...;武汉;北京林业大学生物科学与技...;济宁医学院基础医学院;;（武汉轻工大学食品科学与... |
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| 摘 要： | C型溶菌酶是存在于各种生物组织中的重要的先天性免疫蛋白,是开发天然抑菌剂的良好候选者。以甲壳类动物三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)C型溶菌酶成熟肽为研究对象,首先通过RT-PCR克隆其编码基因"ptlyC";以pPICZαA为表达载体,构建重组表达载体pPICZαA-ptlyC,电转至毕赤酵母(Pichia pastoris)X-33后,通过高浓度的博来霉素筛选到高拷贝酵母转化子;在28℃、250 r/min和pH6.0的条件下,经1%的甲醇诱导表达72 h,得到含重组ptlyC的培养液上清;经固化金属离子亲和层析(IMAC)纯化,得到分子量约为25.3 kD的纯化产物。通过菌落计数法证明含重组ptlyC的培养液上清具有抑制革兰氏阳性的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的活性;通过琼脂糖凝胶扩散法证明纯化的重组ptlyC具有抑制革兰氏阴性的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和沙门氏菌(Salmonella lignieres)的活性。
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