| COX-2的基因克隆和多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 李改丽,王百忍,费玲玲,张萍,杨浩,鞠躬. COX-2的基因克隆和多克隆抗体制备[J]. 生物化学与生物物理进展, 2003, 30(3): 478-482 |
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| 作者姓名： | 李改丽 王百忍 费玲玲 张萍 杨浩 鞠躬 |
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| 作者单位： | 第四军医大学神经科学研究所,西安,710032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（39830130）. |
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| 摘 要： | 环氧合酶-2（COX-2）是一种具有多种功能的神经调节物质，它的许多功能细节仍不十分清楚，还需要进一步深入研究.用PCR技术从大鼠脑cDNA文库中，扩增到正常成年大鼠COX-2的cDNA序列，测序结果与已发表的序列一致.通过PCR扩增和基因重组，分别构建COX-2编码基因全长和羧基端部分编码序列的表达载体，并导入大肠杆菌DH5α中，通过IPTG诱导表达重组融合蛋白，结果导入全长编码基因表达载体的DH5α无COX-2融合蛋白表达，而羧基端部分基因编码的COX-2融合蛋白在DH5α中以包涵体的形式进行表达.经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，在相对分子质量（Mr）为44 000处有1条特异的蛋白质条带.对以包涵体形式表达的蛋白质进行变性、重折叠及纯化后，得到了高纯度融合蛋白.以重组融合蛋白免疫新西兰种大白兔，制作了抗COX-2多克隆抗体，经酶联免疫吸附测定、蛋白质印迹和免疫细胞化学方法检测，此抗体具有较高效价和特异性.COX-2基因和多克隆抗体的获得，为进一步研究COX-2的功能创造了条件.
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| 关 键 词： | COX-2 克隆 融合蛋白 多克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2002-11-19 |
| 修稿时间： | 2002-11-19 |
Cloning of Coding Gene and Preparation of Polyclonal Antibody of COX-2 |
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| LI Gai-Li,WANG Bai-Ren,FEI Ling-Ling,ZHANG Ping,YANG Hao and JU Gong. Cloning of Coding Gene and Preparation of Polyclonal Antibody of COX-2[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 2003, 30(3): 478-482 |
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| Authors: | LI Gai-Li WANG Bai-Ren FEI Ling-Ling ZHANG Ping YANG Hao JU Gong |
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| Affiliation: | Institute of Neurosciences, Fourth Military Medical University, Xi'an 710032, China;Institute of Neurosciences, Fourth Military Medical University, Xi'an 710032, China;Institute of Neurosciences, Fourth Military Medical University, Xi'an 710032, China;Institute of Neurosciences, Fourth Military Medical University, Xi'an 710032, China;Institute of Neurosciences, Fourth Military Medical University, Xi'an 710032, China;Institute of Neurosciences, Fourth Military Medical University, Xi'an 710032, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | COX-2 cloning fusion protein polyclonal antibody |
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