动物血清和单克隆抗体用于ELISA测定灭活脊灰疫苗的抗原量

<正>一、材料与方法 1.病毒和疫苗 病毒:用脊灰Ⅰ型Mahong株、Ⅱ型MEF株和Ⅲ型Saukette株的Hela细胞感染培养收获液,经氯化铯反复梯度离心提纯的D抗原制剂;及D抗原加热60℃2小时制成的C抗原制剂。由滴定法测量D抗原制剂的TcID_(50),Lowry法确定蛋白质含量。 疫苗:用CL疫苗(包括Salk和纯化D抗原型),RIV和IM疫苗;并以RIV的PU_((78)—(02))三价苗作为原价参考疫苗。 2.动物血清 兔抗脊灰I、Ⅱ、Ⅲ型病毒血清:系新西兰白兔用100μg纯化D抗原,2至多次超免(间隔1个月)疫制备的,其中和抗体效价≥1∶20000; 山羊抗脊灰病毒血清:系山羊感染I-Mahoney,Ⅱ-MEF及Ⅲ型-Lansing株后免疫制备的。