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猪瘟病毒E2蛋白B/C抗原区基因在毕赤酵母中的表达与鉴定
引用本文:徐学清,郑其升,曹瑞兵,苏小运,陈溥言.猪瘟病毒E2蛋白B/C抗原区基因在毕赤酵母中的表达与鉴定[J].中国生物工程杂志,2004,24(9):53-57.
作者姓名:徐学清  郑其升  曹瑞兵  苏小运  陈溥言
作者单位:南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室, 南京 210095
基金项目:国家“8 63”计划资助项目 ( 2 0 0 1AA2 490 12 )
摘    要:基于猪瘟病毒主要保护性抗原---E2囊膜糖蛋白有两个相对独立的抗原结构单位---B/C抗原区和A/D抗原区 ,设计引物扩增编码猪瘟病毒E2蛋白B/C抗原区的基因 ,将大小为261bp的PCR产物插入含有强启动子PAOX1和α-MF信号肽序列的巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达载体pPICZαC中 ,构建成重组质粒pPICZα-BC ,酶切线性化后电穿孔导入巴斯德毕赤酵母菌X33 中 ,经ZeocinTM 筛选得到 3株高拷贝转化子 ,甲醇诱导表达 ,SDS-PAGE和Westernblot及ELISA试验表明 ,酵母培养上清液中含有具有良好反应原性的E2蛋白。为研究亚单位疫苗或诊断抗原打下坚实基础。

关 键 词:猪瘟病毒  BC抗原区  毕赤酵母  表达  
收稿时间:2004-05-24
修稿时间:2004年5月24日

Secretion Expression of the Gene Encoding Classical Swine Fever Virus E2 B/C Antigenic Domain in Pichia Pastoris and Identification of the Protein
XU Xue-qing,ZHENG Qi-sheng,CAO Rui-bing,SU Xiao-yun,CHEN Pu-yan.Secretion Expression of the Gene Encoding Classical Swine Fever Virus E2 B/C Antigenic Domain in Pichia Pastoris and Identification of the Protein[J].China Biotechnology,2004,24(9):53-57.
Authors:XU Xue-qing  ZHENG Qi-sheng  CAO Rui-bing  SU Xiao-yun  CHEN Pu-yan
Abstract:
Keywords:CSFV  B/C antigenic domain Pichia pastoris  Expression
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