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| 猪轮状病毒vp4基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达 | |
| 引用本文： | 宋岩,师东方,樊琛,刘胜旺,魏华,李一经.猪轮状病毒vp4基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达[J].中国病毒学,2005,20(1):61-64. |
| 作者姓名： | 宋岩 师东方 樊琛 刘胜旺 魏华 李一经 |
| 作者单位： | 1. 东北农业大学动物医学院病原分子生物学实验室,黑龙江,哈尔滨,150030 2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 3. 东南大学医学院微生物学教研室,江苏,南京,210009 |
| 基金项目： | 黑龙江省"十五"攻关项目(GC02B510) |
| 摘 要： | 本研究扩增猪轮状病毒中国分离株JL94株VP4蛋白主要抗原编码区基因(1-756 bp),将测序结果与国外分离株进行比较;将该基因片段同载体pMel BacA连接后,与杆状病毒DNA共转染入昆虫细胞Sf9,经蚀斑筛选纯化重组病毒并再感染Sf9细胞获得vp4基因的表达,对表达的VP4蛋白进行Western blot分析和血清中和抗体试验.结果表明JL94株VP4主要抗原编码区基因与国外分离株CRW-8株、Gottfried株该基因片段氨基酸同源性分别为96.43%和67%,说明JL94株与CRW-8株属同一VP4血清型,而与Gottfried株属不同血清型.JL94株VP4主要抗原编码区氨基酸最大变异处位于aa81-aa207.vp4基因在昆虫细胞中表达量占细胞总蛋白的20%,Western Blot证实表达蛋白有良好的生物学活性.所表达的蛋白免疫小鼠产生中和抗体,阻断JL94在MA104细胞上引起的细胞病变. |
| 关 键 词： | 猪轮状病毒 vp4基因 主要抗原编码区基因 克隆 真核表达 |
| 文章编号： | 1003-5125(2005)01-0061-04 |
| 修稿时间： | 2004年8月10日 |
Cloning of vp4 Gene from Porcine Rotavirus JL94 Isolate and Expression in Baculovirus System |
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