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水霉菌总DNA提取方法研究
引用本文:可小丽,汪建国,顾泽茂,李明,龚小宁.水霉菌总DNA提取方法研究[J].水生生物学报,2008,12(1):68-73.
作者姓名:可小丽  汪建国  顾泽茂  李明  龚小宁
作者单位:1. 中国科学院水生生物研究所,武汉,430072;中国科学院研究生院,北京,100039
2. 中国科学院水生生物研究所,武汉,430072
基金项目:湖北省科技攻关项目 , 中国科学院前沿领域研究基金
摘    要:本实验采用EP管反复冻融和研磨的破壁方式,利用溶菌酶法、CTAB法、改良CTAB法、尿素法、十二烷基硫酸钠(SDS)法等5种方法,分别对5种鱼类致病性水霉菌(寄生水霉、多子水霉、异株水霉及两未定种)的基因组DNA进行提取,并采用紫外分光光度计和ITS区基因(包括5.8S rDNA)PCR扩增对DNA进行了评价.紫外分光光度计检测结果表明,5种方法均可提取到水霉菌DNA,其中改良CTAB法提取的5种水霉菌的DNA产量和质量最高,A260/A280在1.79-1.82之间,浓度为45μg/mL;PCR检测结果表明,只有改良CTAB法提取的DNA全部扩增到明亮、整齐、无拖尾的特异性条带,其他几种方法均存在暗带或无带现象.因此,改良CTAB法可以作为水霉菌DNA提取以开展分子生物学研究的首选方法.

关 键 词:水霉菌  DNA提取  溶菌酶  十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)  尿素  十二烷基硫酸钠(SDS)  霉菌  提取  方法  生物学研究  EXTRACTION  METHODS  TOTAL  分子  现象  存在  特异性条带  拖尾  浓度  质量  产量  结果  检测  评价  rDNA  基因组  紫外分光光度计
文章编号:1000-3207(2008)01-0068-06
收稿时间:2006-11-02
修稿时间:2007-03-27

Study on total dna extraction methods of Saprolegnia
KE Xiao-Li,WANG Jian-Guo,GU Ze-Mao,LI Ming,GONG Xiao-Ning.Study on total dna extraction methods of Saprolegnia[J].Acta Hydrobiologica Sinica,2008,12(1):68-73.
Authors:KE Xiao-Li  WANG Jian-Guo  GU Ze-Mao  LI Ming  GONG Xiao-Ning
Institution:1.Institute of Hydrobiology, Chinese Academy of Science 2.The Graduate School of the Chinese Academy of Science 3.College of Fisheries,Huazhong Agricultural Vniuersity
Abstract:
Keywords:Saprolegnia  DNA extraction  CTAB  Lysozyme  CH4N2O  SDS
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