| 人源抗体筛选和表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 张福强,王斗斗,宿晓云,马杰.人源抗体筛选和表达载体的构建[J].现代生物医学进展,2008,8(5):817-819. |
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| 作者姓名： | 张福强 王斗斗 宿晓云 马杰 |
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| 作者单位： | 吉林大学药学院,吉林,长春,130021 |
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| 基金项目： | 吉林省再生医学重点实验室资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建一个可供抗体CDR(决定簇互补区)进行自由替换、筛选、表达的通用载体,并对其生物学功能进行鉴定.方法:在已构建好的具有Fc段的完全人源抗狂犬病病毒抗体表达栽体基础上,利用PCR介导的定点突变技术,引入2个可供CDR3区进行自由替换的限制性酶切位点,构建出通用表达载体.体外合成人源、鼠源抗乳腺癌Her2抗体的CDR3区,克隆至已构建的通用载体,在毕赤酵母中诱导表达.应用ELISA和Western Blotting技术对亲本抗体和新抗体进行生物学及免疫学分析.结果:PCR、Western Blotting等试验表明具有Her2抗原结合活性的人源和鼠源突变型抗体获得成功表达,通过对表达产物的免疫学及功能学检测证明所表达出的抗体具有抗原中和活性,而且鼠源抗体的活性要稍高于人源抗体.结论:成功构建了可用于功能性抗体筛选和表达的通用载体,对抗体的体外亲和力成熟及抗体的人源化有重要意义.
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| 关 键 词： | 通用载体 CDR3 筛选 表达 功能性抗体 人源化 抗体筛选 表达载体的构建 Antibodies Humanized Screening Recombinant Vector 意义 体外亲和力成熟 功能性 人源抗体 中和活性 检测 功能学 突变型 结合活性 抗原 试验 结果 分析 |
| 文章编号： | 1673-6273(2008)05-0817-03 |
| 修稿时间： | 2007年10月12 |
Construction of Recombinant Vector for Expressing and Screening of Humanized Antibodies |
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| ZHANG Fu-qiang,WANG Dou-dou,SU Xiao-yun,MA Jie.Construction of Recombinant Vector for Expressing and Screening of Humanized Antibodies[J].Progress in Modern Biomedicine,2008,8(5):817-819. |
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| Authors: | ZHANG Fu-qiang WANG Dou-dou SU Xiao-yun MA Jie |
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