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人4-1BBL胞外区/抗CD20 Fab’融合蛋白的构建和表达
引用本文:姜文国,熊冬生,刘芳,郭红星,苏晔,吕晶丽,杨纯正.人4-1BBL胞外区/抗CD20 Fab’融合蛋白的构建和表达[J].微生物学报,2008,24(3):376-380.
作者姓名:姜文国  熊冬生  刘芳  郭红星  苏晔  吕晶丽  杨纯正
作者单位:滨州医学院, 滨州 256603;中国协和医学科大学/中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室, 天津 300020;中国协和医学科大学/中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室, 天津 300020;中国协和医学科大学/中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室, 天津 300020;中国协和医学科大学/中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室, 天津 300020;中国协和医学科大学/中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室, 天津 300020;中国协和医学科大学/中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室, 天津 300020
基金项目:国家高技术研究发展计划(863)资助 (No. 2003AA215080); 山东省自然科学基金资助(No. Q2006C02)。
摘    要:研究共刺激分子4-1BBL在肿瘤靶向治疗方面的作用, 用PCR 和overlap PCR 方法构建人4-1BBL胞外区/抗CD20 Fab’融合蛋白表达载体, 并用双脱氧终止法测定DNA 序列; 采用亲和层析法纯化该产物, 并用SDS-PAGE和HPLC鉴定纯化产物; 采用玫瑰花环试验鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。DNA 序列测定结果表明: 人4-1BBL胞外区/抗CD20 Fab’融合蛋白已构建成功。表达可溶性产物的产量达200 mg/L以上, 纯度较高, 具有与激活的Jurkat (4-1BBL+) 和Raji细胞(CD20+)结合的活性。这将为非何杰金氏淋巴瘤免疫治疗、靶向治疗提供新的思路。

关 键 词:4-1BBL    CD20    靶向治疗    免疫治疗
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