| 我国西部1a型丙肝病毒结构区的cDNA克隆和序列分析 |
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| 引用本文： | 祁欣,贾文祥,杨春,杨远,曾蔚,陈恬.我国西部1a型丙肝病毒结构区的cDNA克隆和序列分析[J].生物技术通讯,2004,15(2):118-121. |
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| 作者姓名： | 祁欣 贾文祥 杨春 杨远 曾蔚 陈恬 |
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| 作者单位： | 四川大学,华西医学中心基础医学与法医学院微生物学教研室,成都,610041 |
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| 摘 要： | 克隆我国西部丙型肝炎病毒全部结构区基因，为探讨HCV的变异和致癌作用，研制丙肝疫苗作准各。从1名西安市丙肝感染血液中，用Trizol试剂裂解HCV病毒颗粒，用糖原与RNA共沉淀提取HCVRNA，用AMV逆转录酶和随机引物逆转录为eDNA，用RT-PCR方法扩增目的片段并转化到pGEM-T质粒，得到pGEM-T-HCVc、pGEM-T-HCVel和pGEM-T-HCVe2克隆。将以上3个克隆用特定的酶降解，用连结酶进行连接，构建了HCV结构区的完整克隆。将克隆好的质粒pGEM-T-HCVjg从两端双向测广手，得到完整的HCV结构基因eDNA核苷酸序列，总长度为2238bp，与已发表的HCV序列长度一致，未发现缺失或移码突变，序列中间亦未发现转录终止子。本序列与HCVla、lb序列核苷酸的同源性分别为91．8％、84．5％；氨基酸的同源性分别为94.2％、86．3％；应为HCVla亚型。以上结果说明我国西部地区存在HCVla亚型，所克隆HCV结构区eDNA克隆可以用于基因工程表达。
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 cDNA克隆 序列分析 HCV 变异 |
| 文章编号： | 1009-0002(2004)02-0118-04 |
| 修稿时间： | 2003年7月20日 |
Cloning and sequencing of hepatitis C virus construct genomes from western China |
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| QI Xin,JIA Wen-xiang,YANG Chun,YANG Yuan,ZENG Wei,CHEN Tian.Cloning and sequencing of hepatitis C virus construct genomes from western China[J].Letters in Biotechnology,2004,15(2):118-121. |
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| Authors: | QI Xin JIA Wen-xiang YANG Chun YANG Yuan ZENG Wei CHEN Tian |
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| Institution: | QI Xin,JIA Wen-xiang,YANG Chun,YANG Yuan,ZENG Wei,CHEN TianDepartment of Microbiology,Basic Medical College,Huaxi Medical Center,Sichuan University,Chengdu 610045,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hepatitis C virus cDNA cloning homology |
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