| 长心卡帕藻RAPD-PCR反应体系的正交优化研究 |
| |
| 引用本文： | 赵素芬,张婷,应成琦,何培民.长心卡帕藻RAPD-PCR反应体系的正交优化研究[J].生物技术通报,2008(4). |
| |
| 作者姓名： | 赵素芬 张婷 应成琦 何培民 |
| |
| 作者单位： | 1. 上海水产大学生命科学与技术学院,上海,200090;广东海洋大学水产学院,湛江,524025
2. 上海水产大学生命科学与技术学院,上海,200090 |
| |
| 基金项目： | 上海浦江人才计划项目
,
上海市教委优势(重点)学科资助项目 |
| |
| 摘 要： | 采用SDS(十二烷基硫酸钠,20%)法提取了大型海藻长心卡帕藻(Kappaphycus alvarezii)基因组DNA.通过单因子梯度试验,确定了影响随机扩增DNA多态性(RAPD)扩增结果的模板、Mg2 、dNTPs、S22引物、Taq的适宜浓度、退火温度和反应的最佳循环次数;利用正交试验优化了模板、Mg2 、dNTPs、S22引物、Taq的配比浓度.结果表明,在进行长心卡帕藻的RAPD扩增时,在总体积为25μl的反应体系中,模板、Mg2 、dNTPs、S22引物、Taq的最佳浓度分别为15ng、2.0mmol/L、0.2mmol/L、0.25μmol/L、2.5U;退火温度为37℃.反应程序为94℃预变性5min,然后经94℃变性30s、37℃退火1min.72℃延伸2min,进行30次循环,最后在72℃再延伸10min.
|
| 关 键 词： | 长心卡帕藻 DNA提取 随机扩增DNA多态性 反应体系 |
Study on Optimization of RAPD-PCR Reaction System for Kappaphycus alvarezii by Orthogonal Design |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
