| 尿激酶催化结构域S356A突变体在毕氏酵母中的表达、纯化及结晶 |
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| 引用本文： | 赵更香,江龙光,卞传兵,袁彩,侯晓敏,叶晓明,黄子详,黄明东. 尿激酶催化结构域S356A突变体在毕氏酵母中的表达、纯化及结晶[J]. 生物技术通报, 2009, 0(Z1) |
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| 作者姓名： | 赵更香 江龙光 卞传兵 袁彩 侯晓敏 叶晓明 黄子详 黄明东 |
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| 作者单位： | 结构化学国家重点实验室,中国科学院研究生院,中国科学院福建物质结构所,福州,350002 |
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| 基金项目： | 基金委，中科院创新基地，科技部863项目，福建省青年人才项目 |
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| 摘 要： | 采用定位突变和重叠延伸PCR方法扩增尿激酶催化结构域基因片段,将其克隆至表达栽体pPICZαA上,转化毕氏酵母X-33.重组蛋白通过阳离子琼脂糖柱纯化、凝胶层析柱检测,纯度达到99%以上,该重组的尿激酶催化结构域(C279A/N302Q/S356A)不具有丝氨酸蛋白酶活性.用气相扩散法获得蛋白晶体,其衍射分辨率迭1.77(A),结构解析发现在其复合物结构中有三个抑制剂分子苯甲醚.
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| 关 键 词： | 尿激酶 定位突变PCR 表达 纯化 结晶 |
Expression,Purification and Crystallization of the Catalytic Domain of Inactivating Urokinase-type Plasminogen Activator in Pichia pastoris |
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| Zhao Gengxiang,Jiang Longguang,Bian Chuanbing,Yuan Cai,Hou Xiaoming,Ye Xiaoming,Huang Zixiang,Huang Mingdong. Expression,Purification and Crystallization of the Catalytic Domain of Inactivating Urokinase-type Plasminogen Activator in Pichia pastoris[J]. Biotechnology Bulletin, 2009, 0(Z1) |
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| Authors: | Zhao Gengxiang Jiang Longguang Bian Chuanbing Yuan Cai Hou Xiaoming Ye Xiaoming Huang Zixiang Huang Mingdong |
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