深圳地区粉尘螨Ⅱ类变应原基因的多态性分析及其表达蛋白的变应原性鉴定 |
| |
引用本文: | 白羽,吉坤美,刘志刚,蔡成郁.深圳地区粉尘螨Ⅱ类变应原基因的多态性分析及其表达蛋白的变应原性鉴定[J].昆虫学报,2007,50(6):560-566. |
| |
作者姓名: | 白羽 吉坤美 刘志刚 蔡成郁 |
| |
作者单位: | (深圳大学生命科学学院,广东深圳518060) |
| |
基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863计划);国家自然科学基金;广东省科技厅科技计划;粤港关键领域重点突破项目;广东省深圳市科技计划 |
| |
摘 要: | 粉尘螨Ⅱ类变应原(Der fⅡ)是粉尘螨Dermatophagoides farinae主要变应原之一,可引发Ⅰ型变态反应。从深圳地区挑取活粉尘螨,经形态鉴定后纯培养,提取其总RNA,RT-PCR扩增出Der fⅡ 基因,克隆到pMD18-T载体后测序。通过计算机软件分析该基因的多态性。将该目的基因克隆到pET-His表达载体上得到重组质粒pET-Der fⅡ。工程菌经IPTG诱导培养,表达Der fⅡ目的蛋白,该蛋白主要以包涵体形式存在。重组Der fⅡ蛋白通过6His-tag蛋白纯化系统进行分离、纯化,并进行Western blot检测该重组蛋白与对粉尘螨过敏患者血清中IgE的反应性。结果表明,克隆的5株深圳地区的Der fⅡ 基因与GenBank公布的Der fⅡ(AB195580.1)核苷酸序列同源性为96.8%~99.3%,推导的氨基酸序列同源性为93.8%~98.6%。表达纯化的5种重组Der fⅡ蛋白经Western blot检测,表明都具有良好的变应原性。
|
关 键 词: | 粉尘螨 Der fⅡ 变应原 基因多态性 原核表达 |
文章编号: | 0454-6296(2007)06-0560-07 |
收稿时间: | 2006-08-07 |
修稿时间: | 2007-01-05 |
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录! |
| 点击此处可从《昆虫学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《昆虫学报》下载免费的PDF全文 |