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一种高效感染血液细胞的新型靶向性腺病毒载体的构建
引用本文:倪芳,鲁茁壮,王立生,瞿成奎,汪思应. 一种高效感染血液细胞的新型靶向性腺病毒载体的构建[J]. 中国病毒学, 2006, 21(2): 106-110
作者姓名:倪芳  鲁茁壮  王立生  瞿成奎  汪思应
作者单位:1. 安徽医科大学病理生理学教研室,安徽,合肥,230032;军事医学科学院放射医学研究所,北京,100850
2. 军事医学科学院放射医学研究所,北京,100850
3. 安徽医科大学病理生理学教研室,安徽,合肥,230032
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划);中国科学院资助项目;安徽省人才基金
摘    要:人C组5型腺病毒(Ad5)载体能够有效感染上皮来源的细胞,但对造血细胞的感染效率很低,限制了其在造血调控基础研究以及血液病基因治疗中的应用.为了建立高效感染血液细胞的新型靶向性腺病毒载体系统,对5型腺病毒载体的纤维顶球进行了改造,以AdEasy系统为基础,应用递归PCR的方法人工合成人B组11p型腺病毒的部分纤维(fiber)基因,采用一系列分子生物学方法将其替换AdEasy骨架质粒中的人5型腺病毒的fiber基因,得到新的腺病毒骨架质粒命名为pAdEasy-1/F11p,应用带有GFP报告基因的穿梭质粒pShuttle-GFP与AdEasy-1/F11p腺病毒DNA在BJ5183细菌内重组得到重组腺病毒质粒,将其转染293细胞获得重组腺病毒,命名为Ad5F11p-GFP.以Ad5-GFP作对照,同时感染K562、U937等白血病细胞系,流式细胞仪检测GFP的表达.初步检测结果显示在10MOI时,Ad5F11p-GFP能够有效感染K562、U937等白血病细胞系,感染细胞效率>90%,对照Ad5-GFP感染细胞效率<30%,这表明改建后的腺病毒AdEasy-1/F11p可以高效介导基因转移到血液细胞,是一种很好的血液细胞靶向性腺病毒载体.

关 键 词:血液细胞  靶向  腺病毒载体
文章编号:1003-5125(2006)02-0106-05
修稿时间:2005-08-22

Construction of a Novel Retargeted Adenoviral Vector with High Gene Transfer Efficiency into Hematopoietic Cells
NI Fang,LU Zhuo-zhuang,WANG Li-sheng,QU Cheng-kui,WANG Si-ying. Construction of a Novel Retargeted Adenoviral Vector with High Gene Transfer Efficiency into Hematopoietic Cells[J]. Virologica Sinica, 2006, 21(2): 106-110
Authors:NI Fang  LU Zhuo-zhuang  WANG Li-sheng  QU Cheng-kui  WANG Si-ying
Affiliation:1.Department of Pathophysiology, Anhui Medical University, Hefei 230032, China2.Institute of Radiation Medicine, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China
Abstract:
Keywords:Hematopoietic cells   Retargeting   Adenoviral vector
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