| TaqMan—MGB荧光定量RT-PCR技术快速检测H5亚型禽流感病毒 |
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| 引用本文： | 卢亦愚 严菊英 冯燕 徐昌平 史雯 茅海燕. TaqMan—MGB荧光定量RT-PCR技术快速检测H5亚型禽流感病毒[J]. Virologica Sinica, 2006, 21(5): 472-476 |
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| 作者姓名： | 卢亦愚 严菊英 冯燕 徐昌平 史雯 茅海燕 |
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| 作者单位： | 浙江省疾病预防控制中心 浙江杭州310009 |
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| 基金项目： | 浙江省自然科学基金重点项目（Z303909） |
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| 摘 要： | 建立以TaqMan-MGB荧光探针为特点的荧光定量RT-PCR方法,用于检测H5亚型禽流感病毒。针对H5亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因保守区域设计特异性引物与TaqMan-MGB荧光探针,筛选并优化荧光定量RT-PCR反应体系与反应条件,用以提高方法的特异性、敏感性与准确性;并通过体外克隆技术建立病毒基因拷贝数进行定量分析。结果表明:引物与探针的优化浓度分别640nmol/L和480nmol/L,体系具有良好的保守性和特异性,与其他呼吸道病毒均无交叉反应。方法检测灵敏度为100拷贝/反应,标准曲线线性范围为107～102拷贝/反应,从病毒核酸提取至检测完成仅需3h左右,操作简便,重现性好。本研究建立的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法特异、敏感、快速,适合于临床实验室进行H5亚型禽流感病毒的快速定量检测。
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| 关 键 词： | 荧光定量RT-PCR TaqMan-MGB探针 H5亚型禽流感病毒(AIVH5) |
| 修稿时间： | 2006-04-24 |
Rapid Detection of Avian Influenza virus H5 by Real-Time RT-PCR and TaqMan-MGB probe |
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| LU Yi-yu, YAN Ju-ying, FENG Yan, XU Chang-ping, SHI Wen, MAO Hai-yan. Rapid Detection of Avian Influenza virus H5 by Real-Time RT-PCR and TaqMan-MGB probe[J]. 中国病毒学(英文版), 2006, 21(5): 472-476 |
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| Authors: | LU Yi-yu YAN Ju-ying FENG Yan XU Chang-ping SHI Wen MAO Hai-yan |
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| Affiliation: | Center for Disease Control and Prevention of Zhejiang province, Hangzhou 310009 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Real-time RT-PCR TaqMan-MGB probe Avain influenza virus subtype H5(AIV H5) |
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