从小牛胸腺分离纯化末端脱氧核苷酸转移酶 |
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作者姓名: | 苏国富 刘传暄 徐永强 马清钧 黄翠芬 |
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作者单位: | 军事医学科学院 北京(苏国富,刘传暄,徐永强,马清钧),军事医学科学院 北京(黄翠芬) |
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摘 要: | 本文采用Okamura氏的寡聚脱氧胸苷酸(oligo-dT)-纤维素柱层析法分离纯化小牛胸腺末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)。包括下列主要步骤:制备酶粗提液、磷酸纤维素柱层析、二乙基氨基乙基纤维素柱层析、葡聚糖凝胶过滤、oligo dT-纤维素亲和层析。经过上述几步分离纯化,从500克小牛胸腺中获得6,564单位TdT,比活性达5,199单位/毫克蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳呈一条带,不含脱氧核糖核酸(DNA)多聚酶Ⅰ。
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