VPA1500基因缺失对副溶血弧菌生物学特性和致病性的影响

Ⅵ型分泌系统（T6SS）是细菌的一种毒力因子分泌系统，通过分泌蛋白参与调控细菌的环境适应性和毒力。副溶血弧菌具有两个T6SS系统（T6SS1和T6SS2）。[目的] 前期通过差异蛋白质组学技术筛选到副溶血弧菌T6SS1相关的分泌蛋白，本文选择其中的VPA1500为研究对象，研究其基因缺失对副溶血弧菌的生物学特性及致病性的影响。[方法] 利用同源重组技术构建缺失株ΔVPA1500和互补株CΔVPA1500；分析各菌株生长特性、在体外的细菌竞争能力、运动性、细菌鞭毛相关基因的转录水平及生物被膜形成能力的差异，比较各菌株对细胞毒性、小鼠毒力、动物组织载菌量以及组织病理学变化的影响。[结果] 与野生株相比，VPA1500基因缺失后不影响细菌的生长能力、生物被膜形成能力和群集运动，然而ΔVPA1500的浮泳运动能力显著下降；进一步通过透射电镜观察和实时定量PCR检测发现，VPA1500缺失影响副溶血弧菌鞭毛的形成；细菌竞争实验显示缺失VPA1500基因降低了副溶血弧菌野生株体外对大肠杆菌的杀伤能力；ΔVPA1500对细胞毒性、小鼠毒力以及在动物组织的定殖能力均显著低于野生株，互补株毒力基本恢复至野生株水平；组织病理学结果进一步表明，缺失VPA1500基因能够降低副溶血弧菌对小鼠组织的损伤。[结论] VPA1500参与副溶血弧菌的体外细菌竞争能力、浮游运动能力和致病性。

Study on biological characteristics and pathogenicity of VPA1500 gene knock-out mutant of Vibrio parahaemolyticus