| Enzymatic synthesis of D-tagatose from lactose with the combination of β-galactosidase and L-arabinose isomerase |
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| 作者单位： | 1. 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海,200237
2. 天津科技大学生物工程学院,天津,300457
3. 上海斯贝生物科技有限公司,上海,200235 |
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| 摘 要： | 将大肠杆菌K-12中的β-半乳糖苷酶基因lacZ和L-阿拉伯糖异构酶基因araA以串联方式克隆到载体pET-28a(+)上,并转入大肠杆菌BL21( DE3)中进行表达.通过SDS-PAGE分析发现,重组菌株能表达出大量可溶性β-半乳糖苷酶蛋白和L-阿拉伯糖异构酶蛋白.以重悬菌液为酶源,可将乳糖降解为D-半乳糖,并将D-半乳糖转化为D-塔格糖.在温度为50℃,pH 7.0的缓冲液中,经一段时间反应后,D-塔格糖的转化率可达21％以上.加入Mn2+、Co2+和Fe2+均能够使D-塔格糖的转化率提高.
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| 关 键 词： | 大肠杆菌 L-阿拉伯糖异构酶 β-半乳糖苷酶 D-塔格糖 |
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