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禽流感病毒M2e、NP多表位嵌合肽抗原的构建及免疫原性
引用本文:徐海,侯红岩,邓碧华,郑其升,侯继波.禽流感病毒M2e、NP多表位嵌合肽抗原的构建及免疫原性[J].微生物学报,2009,49(6):807-812.
作者姓名:徐海  侯红岩  邓碧华  郑其升  侯继波
作者单位:江苏省农业科学院,国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京,210014
基金项目:江苏省高科技资助项目;江苏省农业科学院基金资助项目
摘    要:摘要: 【目的】为了克服传统禽流感疫苗各亚型之间无交叉保护的缺陷,研制抗禽流感通用型疫苗。【方法】 以禽流感病毒M2e、NP表位为基础串联T细胞表位构建4个原核表达载体: pET-3M2e、pET-3M2e-NP1,2-Fc、pET-3M2e-NP1,2、pET-TCE-3M2e-NP1,2。纯化重组蛋白并与弗氏佐剂混合制成疫苗,胸部肌肉注射免疫20日龄非免鸡(150μg/只),4个融合蛋白分为四组,每组十只。ELISA方法检测血清中M2e抗体水平;在MDCK细胞上检测血清与H9N2亚型禽流感病毒的结合能力,在鸡胚上检测其中和能力;以流式细胞仪测定CD4+、CD8+T淋巴细胞的变化。【结果】研究发现,各免疫组均能检测到高水平的ELISA抗体,免疫荧光显示抗血清均能跟病毒特异性结合,中和试验表明抗血清不能中和病毒但能抑制病毒的复制。流式细胞仪检测显示外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞所占比例在免疫后均有明显升高(P<0.05),TCE-3M2e-NP1, 2组CD4+、CD8+T淋巴细胞所占比例分别达到47.23%和36.77%,具有细胞免疫的特征。【结论】构建的嵌合肽抗原具有较好的免疫原性,能刺激机体产生体液和细胞免疫,为进一步研制抗禽流感通用型疫苗做出有益的探索。

关 键 词:关键词:  禽流感病毒  原核表达  抗原表位  保守序列
收稿时间:2008/12/9 0:00:00
修稿时间:2009/2/27 0:00:00

Construction and immunogenicity of chimeric peptide antigen composed of M2e and NP genes of avian influenza virus
Hai Xu,Hongyan Hou,Bihua Deng,Qisheng Zheng and Jibo Hou.Construction and immunogenicity of chimeric peptide antigen composed of M2e and NP genes of avian influenza virus[J].Acta Microbiologica Sinica,2009,49(6):807-812.
Authors:Hai Xu  Hongyan Hou  Bihua Deng  Qisheng Zheng and Jibo Hou
Institution:National Veterinary Biological Medicine Engineering Research Center, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China;National Veterinary Biological Medicine Engineering Research Center, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China;National Veterinary Biological Medicine Engineering Research Center, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China;National Veterinary Biological Medicine Engineering Research Center, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China;National Veterinary Biological Medicine Engineering Research Center, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China
Abstract:
Keywords:Keywords: Avian Influenza Virus  prokaryotic expression  antigen epitope  consensus sequence
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