| 四数獐牙菜ISSR-PCR反应体系的正交优化 |
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| 引用本文： | 杨路存,陈桂琛,周国英,宋文珠,李春丽,许璟瑛.四数獐牙菜ISSR-PCR反应体系的正交优化[J].生物技术通报,2010(9). |
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| 作者姓名： | 杨路存 陈桂琛 周国英 宋文珠 李春丽 许璟瑛 |
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| 作者单位： | 1. 中国科学院西北高原生物研究所,西宁,810001;中国科学院研究生院,北京,100039
2. 中国科学院西北高原生物研究所,西宁,810001 |
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| 摘 要： | 采用正交试验与单因素设计相结合的方法,对四数獐牙菜ISSR-PCR反应体系中的4种主要因素(Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTP及引物)进行优化筛选,PCR结果用统计软件SPSS16.0分析。结果显示,Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTP这3因素的不同水平对PCR反应结果都有显著影响,其中Mg2+的浓度影响最大。筛选出各反应因素的最佳水平,建立四数獐牙菜ISSR-PCR反应的最佳体系(25μL)为3.0 mmol/L Mg2+,250μmol/L dNTP,0.6μmol/L引物,1UTaqDNA聚合酶,40 ngDNA,2.5μL10×buffer。这一体系的建立为今后利用ISSR技术进行四数獐牙菜遗传多样性分析以及物种保护奠定了技术基础。
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| 关 键 词： | 四数獐牙菜 正交设计 体系优化 |
Optimization for ISSR-PCR Reaction System in Swertia tetraptera Using Orthogonal Design |
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| Yang Lucun,Chen Guichen,Zhou Guoying,Song Wenzhu,Li Chunli,Xu Jingying.Optimization for ISSR-PCR Reaction System in Swertia tetraptera Using Orthogonal Design[J].Biotechnology Bulletin,2010(9). |
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| Authors: | Yang Lucun Chen Guichen Zhou Guoying Song Wenzhu Li Chunli Xu Jingying |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ISSR-PCR |
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