| 人巨细胞病毒pp65蛋白的原核表达及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 许凤,邱义兰,邱果,李桑,何赛,郑姣,李小曼,刘如石.人巨细胞病毒pp65蛋白的原核表达及活性鉴定[J].生命科学研究,2013(4):298-304,309. |
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| 作者姓名： | 许凤 邱义兰 邱果 李桑 何赛 郑姣 李小曼 刘如石 |
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| 作者单位： | 湖南师范大学生命科学学院;湖南师范大学医学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31072141);湖南省科技计划重点项目(2011SK2014);长沙市科技计划重点项目(K1104047-31);湖南省自然科学基金重点资助项目(12JJ2013);湖南省高等学校科学研究青年项目(10B060);湖南省科技计划项目(2013SK3129) |
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| 摘 要： | 以病毒全基因组为模板,通过PCR技术扩增HCMV pp65基因编码序列,其产物连接到pMD18-T质粒,酶切并回收目的片段后克隆到表达载体pTO-T7,然后将重组质粒pTO-T7-pp65转化大肠杆菌ER2566,大量表达后将重组蛋白进行质谱法分析鉴定,再利用Western blot以及间接ELISA进行重组蛋白的活性及抗原性鉴定.结果显示:通过SDS-PAGE鉴定可知,大肠杆菌可能表达出了重组蛋白,质谱分析结果说明了重组蛋白为pp65蛋白,具有极高可信度,其相对分子质量约为63 kD,从Western blot和间接ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)的结果可知,pp65蛋白作为抗原具有良好的免疫反应性与免疫原性,为制备相应的抗原诊断单克隆抗体打下了基础,同时也为开发HCMV IgG快速诊断ELISA试剂盒提供了可选原料.
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| 关 键 词： | 人巨细胞病毒pp65蛋白 质谱 酶联免疫吸附(ELISA) 免疫反应性 免疫原性 |
Expression and Immunoreactivity of Human Cytomegalovirus pp65 Protein in E. coli |
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| XU Feng;QIU Yi-lan;QIU Guo;LI Sang;HE Sai;ZHENG Jiao;LI Xiao-man;LIU Ru-shi.Expression and Immunoreactivity of Human Cytomegalovirus pp65 Protein in E. coli[J].Life Science Research,2013(4):298-304,309. |
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| Authors: | XU Feng;QIU Yi-lan;QIU Guo;LI Sang;HE Sai;ZHENG Jiao;LI Xiao-man;LIU Ru-shi |
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| Institution: | XU Feng;QIU Yi-lan;QIU Guo;LI Sang;HE Sai;ZHENG Jiao;LI Xiao-man;LIU Ru-shi;School of Life Science, Hunan Normal University;Medical College, Hunan Normal University; |
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