| 胶孢炭疽菌热休克蛋白基因Cghsp90的RNAi突变体获得与功能分析 |
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| 作者姓名： | 苏初连 蒲金基 康浩 杨石有 刘晓妹 张贺 |
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| 作者单位： | 海南大学热带农林学院,海口,570228;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所,海口,571101;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所,海口,571101;海南大学热带农林学院,海口,570228 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划;国家自然科学基金;中国热带农科院基本科研业务费专项;海南省重大科技项目 |
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| 摘 要： | 为揭示胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)热休克蛋白基因Cghsp90在抗逆境胁迫中的功能,利用RNAi技术结合PEG介导的原生质体转化方法,获得了Cghsp90的RNAi突变体菌株,经实时荧光定量PCR (qRT-PCR)对野生型菌株和突变体菌株间Cghsp90基因差异表达分析以及NaCl、H_2O_2、SDS、Congo Red、18℃(Cold)和33℃(Hot)等非生物胁迫条件下野生型菌株和突变体菌株的胁迫耐受性分析。通过特异性引物检测鉴定、qRT-PCR分析,获得Cghsp90的RNAi突变体pSilent-1:Cghsp90-1和pSilent-1:Cghsp90-2;与野生型菌株相比,侵染过程中Cghsp90基因的表达量显著低于野生型菌株,8个致病相关基因显著下调表达;突变体菌株的产孢量下降、分生孢子畸形、萌发率下降;在非生物胁迫条件下,突变体菌株较野生型菌株更为敏感;在胶孢炭疽菌的分生孢子中研究Cghsp90基因的形态建成与萌发,对应变逆境胁迫以及调控致病相关基因等方面发挥重要的作用。
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| 关 键 词： | 胶孢炭疽菌 Cghsp90基因 RNAi突变体 qRT-PCR |
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