| 肺炎克雷伯菌调控蛋白RcsAB的构建表达及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 李璇,彭丹,刘品,苏克文,何蔷,张仲双,邱景富,李迎丽. 肺炎克雷伯菌调控蛋白RcsAB的构建表达及活性鉴定[J]. 基因组学与应用生物学, 2019, 38(2): 630-635 |
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| 作者姓名： | 李璇 彭丹 刘品 苏克文 何蔷 张仲双 邱景富 李迎丽 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学,公共卫生与管理学院医学与社会发展研究中心,重庆,400016;重庆医科大学,公共卫生与管理学院健康领域社会风险预测治理协同创新中心,重庆,400016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 为了探讨转录调控子Rcs AB对靶基因的转录调控作用,构建肺炎克雷伯菌RcsA和RcsB的重组质粒,之后诱导蛋白表达,提取纯化后测定其活性。PCR得到rcsA、rcsB片段,分别将两DNA片段克隆至表达载体pMAL-C5X、pET28a,构建重组质粒。再将重组质粒导入E. coli BL21(DE3)菌株中,经IPTG诱导后收集菌体,超声破碎。破碎后的上清过柱、透析纯化,得到高纯度的蛋白,通过EMSA进行蛋白活性鉴定。RcsA,RcsB蛋白成功表达纯化,并能够与靶基因结合,初步证明蛋白具有生物学活性。成功制备有生物学活性的RcsA、RcsB蛋白,为进一步研究RcsAB蛋白复合物特异的生物学功能提供物质基础。
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| 关 键 词： | 肺炎克雷伯菌 RcsAB 蛋白表达 纯化 |
Construction Expression and Activity Identification of Regulatory Protein RcsAB in Klebsiella pneumoniae |
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| Affiliation: | (Research Center for Medicine and Social Development,School of Public Health and Management,Chongqing Medical University,Chongqing,400016;Innovation Center for Social Risk Governance in Health,School of Public Health and Management,Chongqing Medical University,Chongqing, 400016) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Klebsiella pneumoniae RcsAB Prokaryotic expression Protein purification |
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