应用PCR重组技术构建大肠杆菌分泌型表达载体

应用ＰＣＲ重组技术，对大肠杆菌分泌型表达载体ｐＩＮ－ⅢｏｍｐＡ进行改建，除去原载体的ＨｉｎｄⅢ位点，将信号肽序列末端两个密码子ＣＡＧ ＧＣＣ改为ＣＡＡ ＧＣＴ，从而引入一个新的ＨｉｎｄⅢ位点，并在其下游接上一段多克隆位点序列，改建后的载体可用于直接插入外源ＤＮＡ编码序更，表达产物在分泌过程中被切除信号肽而成为天然有活性的蛋白质，操作十分简便。