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反向PCR方法克隆腾冲嗜酸两面菌的分子伴侣基因*
作者姓名:马晴   张渝英  
作者单位:1.北京师范大学生命科学学院; 2.中国科学院微生物研究所 北京;
摘    要:根据已知的Sulfolobus属的分子伴侣基因,设计简并引物,用PCR的方法从腾冲嗜酸两面菌(Acidianus tengchongensis)基因组DNA中分别克隆到了分子伴侣α亚基和β亚基的约500bp的基因片段。以它们为探针进行Southern杂交,确定了合适的限制性内切酶。以确定的限制性内切酶消化的基因组DNA环化物为模板,进行反向PCR反应,引物的延伸方向由已知序列出发沿环化分子向未知区域进行,扩增产物经测序表明为α亚基和β亚基基因。根据所得序列分别设计两对引物进行PCR,测序结果

关 键 词:腾冲嗜酸两面菌   反向PCR   分子伴侣  
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