RT-PCR联合一步法扩增G蛋白α亚基基因的开放阅读框 |
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引用本文: | 彭艳华,黄永秀,齐义鹏.RT-PCR联合一步法扩增G蛋白α亚基基因的开放阅读框[J].武汉植物学研究,1996(2). |
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作者姓名: | 彭艳华 黄永秀 齐义鹏 |
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作者单位: | 武汉大学病毒系分子病毒室,中国科学院武汉植物研究所 |
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摘 要: | 报道逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)联合一步程序,扩增大于1kb的拟南芥菜G蛋白α亚基基因的开放阅读框。该程序中,当RNA模板和引物变性,并在同一管中加入PCR缓冲液、4种dNTP底物、逆转录酶和TaqDNA聚合酶之后,就不需其它手工操作步骤,因而可同时进行大批量样品的操作。实验结果证明AMV(鸟类骨髓性白血病病毒)逆转录酶对TaqDNA聚合酶的活性没有抑制作用。这种RT-PCR联合一步法可从0.5μg的总RNA中快速地扩增长于1.0kb的cDNA片段。
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关 键 词: | 逆转录-多聚酶链式反应,信使核糖核酸,开放阅读框,G蛋白α亚基基因,拟南芥菜 |
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