| 碳阻遏因子CRE对匍枝根霉产纤维素酶调控作用的研究 |
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| 引用本文： | 孟庆婷,汤斌.碳阻遏因子CRE对匍枝根霉产纤维素酶调控作用的研究[J].中国生物工程杂志,2016,36(3):31-37. |
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| 作者姓名： | 孟庆婷 汤斌 |
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| 作者单位： | 安徽工程大学微生物发酵安徽省工程技术研究中心 芜湖 241000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31270135) |
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| 摘 要： | 为研究匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)TP-02中碳代谢阻遏因子CRE对其产纤维素酶的调控特性,从其基因组DNA中扩增得到CRE全长基因,并利用重叠PCR(overlapping PCR)技术将潮霉素B抗性基因(hygB)插入其中,既破坏cre正常转录又提供了筛选标记。通过电转化将pUCm-T-cre-hygB导入匍枝根霉萌发孢子,经抗性筛选得到△CRE突变株。利用RT-qPCR对此突变株纤维素酶基因转录水平进行研究,发现 eg、bg、cbh1和cbh2 的转录均有所提高,分别为48.75%、26%、5.6%和38.6%。同时,△CRE突变株的纤维素酶在表达水平上也均高于原菌,其中内切葡聚糖苷酶酶活提高了58.62%。CRE的破坏在一定程度上减弱了碳阻遏效应,其对纤维素酶的调控具有特异性。其中,对内切酶的调控最为显著。此外,△CRE突变株在3%糖浓度下仍高产纤维素酶,这为后续酶系优化及产业化生产提供了一定的依据。
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| 关 键 词： | 碳阻遏因子 匍枝根霉 纤维素酶 转录调控 |
| 收稿时间： | 2015-09-28 |
The Role of Carbon Metabolism Repressor CRE in the Regulation of Cellulase Produced by Rhizopus stolonifer |
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| MENG Qing-ting,TANG Bin.The Role of Carbon Metabolism Repressor CRE in the Regulation of Cellulase Produced by Rhizopus stolonifer[J].China Biotechnology,2016,36(3):31-37. |
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| Authors: | MENG Qing-ting TANG Bin |
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| Keywords: | |
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