| 高产β-胡萝卜素酿酒酵母菌株的设计与构建 |
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| 引用本文： | 王瑞钊,潘才惠,王颖,肖文海,元英进. 高产β-胡萝卜素酿酒酵母菌株的设计与构建[J]. 中国生物工程杂志, 2016, 36(7): 83-91. DOI: 10.13523/j.cb.20160712 |
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| 作者姓名： | 王瑞钊 潘才惠 王颖 肖文海 元英进 |
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| 作者单位： | 1 天津大学化工学院制药工程系 系统生物工程教育部重点实验室 天津 300072;2 天津化学化工协同创新中心合成生物学平台 天津 300072 |
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| 基金项目： | 国家“863”计划资助项目（2012AA02A701） |
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| 摘 要： | 酿酒酵母是一种重要的食品安全的工业微生物宿主。如何精确地控制代谢路径中相关基因的表达强度,是在酿酒酵母体内合成β-胡萝卜素的关键因素。通过在Delta位点整合红发夫酵母来源的β-胡萝卜素合成基因(crt E、crt I、crt YB),构建β-胡萝卜素生产菌库。从中挑选28株颜色较黄的菌株,通过96孔细胞培养板及摇瓶发酵,发现这些菌株β-胡萝卜素产量存在显著差异(产量从5.70mg/L到61.88mg/L动态分布)。然后以其中β-胡萝卜素产量最高的菌为出发菌(Sy BE_Sc118012),在敲除该菌株内源基因ypl062w的同时,在此位点过表达t HMG1和BTS1-ERG20融合蛋白以增加前体供应,最终使β-胡萝卜素的产量提高1.65倍,达到162.1mg/L,是目前已知的摇瓶水平最高发酵产量。因此,通过Delta位点整合和增加前体供应结合的策略来强化酿酒酵母中的异源表达具有重要的指导意义。
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| 关 键 词： | 合成生物学 酿酒酵母 Delta位点 β-胡萝卜素 前体供应 基因拷贝数目 |
| 收稿时间： | 2016-01-04 |
Design and Construction of highβ-carotene Producing Saccharomyces cerevisiae |
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| WANG Rui-zhao,PAN Cai-hui,WANG Ying,XIAO Wen-hai,YUAN Ying-jin. Design and Construction of highβ-carotene Producing Saccharomyces cerevisiae[J]. China Biotechnology, 2016, 36(7): 83-91. DOI: 10.13523/j.cb.20160712 |
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| Authors: | WANG Rui-zhao PAN Cai-hui WANG Ying XIAO Wen-hai YUAN Ying-jin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | β-carotene site Precursor supply Saccharomyces cerevisiae Synthetic biology &delta Gene copy number |
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