| 下调Perilipin 1基因表达对3T3-L1细胞脂解的影响 |
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| 引用本文： | 赵志武,王君实,马敏,张少华,燕炯.下调Perilipin 1基因表达对3T3-L1细胞脂解的影响[J].中国生物工程杂志,2016,36(3):17-22. |
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| 作者姓名： | 赵志武 王君实 马敏 张少华 燕炯 |
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| 作者单位： | 山西医科大学公共卫生学院 太原 030001 |
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| 摘 要： | 目的:研究下调围脂滴蛋白基因(PLIN1)表达对3T3-L1细胞脂解的影响。方法:采用RNA干扰技术,构建3组阳性及1组阴性sh-PLIN1重组载体,并进行菌液PCR和DNA测序鉴定。Western blot测定PLIN1A蛋白表达,评价载体下调效果。细胞转染有效载体2天后,Bodipy 493/503染色脂滴;酶学方法测定细胞中甘油三酯和甘油含量;Western blot检测甘油三酯脂肪酶(ATGL)、激素敏感性脂肪酶(HSL)及其磷酸化蛋白(p-HSL)的表达。酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞中环磷酸腺苷(c AMP)和蛋白激酶A(PKA)的浓度。结果:各sh-PLIN1干扰载体构建成功,且3组阳性载体均能显著下调PLIN1A蛋白的表达(P0.05)。转染有效载体后,与阴性转染组相比,sh-PLIN1转染组细胞中脂滴减小,甘油三酯含量降低,甘油含量升高,ATGL和HSL相对表达量显著升高(P0.05),p-HSL相对表达量及c AMP、PKA的浓度无显著性差异(P0.05)。结论:下调PLIN1基因表达可加快3T3-L1细胞脂解速率,其可能通过上调ATGL和HSL的表达而实现,c AMP/PKA信号通路对其无明显调节作用。
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| 关 键 词： | RNA干扰 脂解 围脂滴蛋白 细胞转染 3T3-L1前脂肪细胞 |
| 收稿时间： | 2015-09-17 |
Effect of Down-regulated Perilipin 1 Gene Expression on Lipolysis of 3T3-L1 Adipocytes |
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| ZHAO Zhi-wu,WANG Jun-shi,MA Min,ZHANG Shao-hua,YAN Jiong.Effect of Down-regulated Perilipin 1 Gene Expression on Lipolysis of 3T3-L1 Adipocytes[J].China Biotechnology,2016,36(3):17-22. |
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| Authors: | ZHAO Zhi-wu WANG Jun-shi MA Min ZHANG Shao-hua YAN Jiong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lipolysis 3T3-L1 preadipocytes Cell transfection Perilipin 1 RNA interference |
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