表达不同致病型S基因重组鸡传染性支气管炎病毒的细胞嗜性研究 |
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作者姓名: | 姜逸 周生 俞燕 唐梦君 程旭 赵秀美 |
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作者单位: | 中国农业科学院家禽研究所,扬州,225003;中国农业科学院家禽研究所,扬州,225003;中国农业科学院家禽研究所,扬州,225003;中国农业科学院家禽研究所,扬州,225003;中国农业科学院家禽研究所,扬州,225003;中国农业科学院家禽研究所,扬州,225003 |
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基金项目: | 国家自然科学基金青年基金;题目;S蛋白介导的鸡传染性支气管炎病毒适应CK细胞的分子基础研究;国家自然科学基金面上项目;题目;江苏省科技支撑计划;题目;扬州市自然科学基金;题目;The present work was supported by the National Natural Science Foundation of China(31602091,Study on the molecular basis of S2 protein mediated Avian Infectious Bronchitis Virus adaptation to CK cells);National Natural Science Foundation of China(31572524,The molecular mechanisms off virulence attenuation of chicken embryo-adapted avian infectious bronchitis virus);Jiangsu Province Agricultural Science & Technology Support Program(BE2012369,Development of Recombinant Live Attenuated Vaccine against Chicken Infectious Bronchitis);the Natural Science Foundation of Yangzhou Scientific and Technological Foundation for Young Talents,China (YZ2014029;Construction of Recombinant Infectious Bronchitis Virus Vaccine Candidate with Chimeric Strain S Gene |
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摘 要: | 鸡传染性支气管炎病毒(IBV)在体外进行细胞培养比较困难,并且不同来源毒株在易感性上也存在差异。为揭示IBV适应CK细胞培养的分子基础,优化其细胞培养技术,本研究首先对H120疫苗株和IBYZ分离株的分子克隆株rH120和rIBYZ,在鸡胚、鸡气管环以及原代鸡肾细胞(CK)上培养时组织细胞的嗜性差异进行了比较,结果发现rIBYZ与rH120在CK上的亲嗜性存在显著差异。在此基础之上,课题组借助前期建立的IBV反向遗传操作系统,将H120疫苗株和IBYZ株的S基因进行交叉替换,成功拯救获得2株重组病毒rH120-S/YZ和rIBYZ-S/H120。通过比较不同毒株感染CK细胞后的病变、特异性免疫荧光的强度以及病毒的增殖曲线,表明刺突蛋白(S)在IBV适应CK细胞过程中发挥决定性作用。本文揭示了S蛋白对细胞嗜性的影响,为进一步探索IBV适应细胞的分子机制奠定了基础。
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关 键 词: | 传染性支气管炎病毒(IBV) 刺突蛋白(S) 细胞嗜性 反向遗传 |
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