| 中华蜜蜂囊状幼虫病病毒单克隆抗体的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 张鹤,李明,孙莉,费东亮,岳金金,金宏凯,马鸣潇.中华蜜蜂囊状幼虫病病毒单克隆抗体的制备与鉴定[J].病毒学报,2017,33(6):914-919. |
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| 作者姓名： | 张鹤 李明 孙莉 费东亮 岳金金 金宏凯 马鸣潇 |
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| 作者单位： | 锦州医科大学畜牧兽医学院,锦州,121000;锦州医科大学畜牧兽医学院,锦州,121000;锦州医科大学畜牧兽医学院,锦州,121000;锦州医科大学畜牧兽医学院,锦州,121000;锦州医科大学畜牧兽医学院,锦州,121000;锦州医科大学畜牧兽医学院,锦州,121000;锦州医科大学畜牧兽医学院,锦州,121000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目;题目;辽宁省高等学校优秀科技人才支持计划;题目;National Natural Science Foundation of China(31372435;Excellent Talents Supporting Program of Higher Education in Liaoning Province(LR2015038 |
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| 摘 要： | 为了制备中华蜜蜂囊状幼虫病病毒(CSBV)单克隆抗体,本实验利用纯化的中华蜜蜂囊状幼虫病毒(CSBV)免疫Balb/c小鼠,经过3次免疫后,小鼠断尾采血测其血清效价,选择效价高于1∶80 000的小鼠,在细胞融合前3~4d再加强免疫一次。取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,用间接ELISA筛选阳性细胞株并进行3次亚克隆后注射入Balb/c小鼠(Mus musculus)腹腔制备单抗腹水。共获得9株稳定分泌抗CSBV的单克隆抗体,命名为10A1、5B10、5A5、5H2、11D7、9A5、1D3、3C10、10C4,效价都在1∶16 000以上,经间接ELISA实验检测表明,具有较好的特异性。在此基础上,将9株腹水单抗分别与CSBV互作后,接种于2~3日龄中华蜜蜂幼虫,观察幼虫死亡率,研究单克隆抗体中和CSBV病毒能力,结果表明筛选到三株单克隆抗体(10A1、5A5、9A5)对CSBV有中和作用,为CSBV的防治研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 中华蜜蜂囊状幼虫病毒(CSBV) 杂交瘤细胞 单克隆抗体(McAb) |
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