高致病性A(H5N8)亚型禽流感病毒NA基因核酸检测方法的建立 |
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作者姓名: | 李晓丹 张烨 薄洪 杨磊 舒跃龙 王大燕 |
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作者单位: | 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,卫生和计划生育委员会医学病毒和病毒病重点实验室,北京102206;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,卫生和计划生育委员会医学病毒和病毒病重点实验室,北京102206;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,卫生和计划生育委员会医学病毒和病毒病重点实验室,北京102206;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,卫生和计划生育委员会医学病毒和病毒病重点实验室,北京102206;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,卫生和计划生育委员会医学病毒和病毒病重点实验室,北京102206;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,卫生和计划生育委员会医学病毒和病毒病重点实验室,北京102206 |
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基金项目: | 国家重点研发计划;题目 |
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摘 要: | 建立以Real-time PCR为基础的新型高致病性A(H5N8)亚型禽流感病毒NA基因检测方法。针对2016年6月起频繁暴发的H5N8禽流感疫情,从GenBank和Global Initiative on Sharing All Influenza Data(GISAID)下载2014年以来的H5N8亚型禽流感病毒的NA序列,通过序列比对,在相对保守区域设计适用于实时荧光逆转录聚合酶链式反应(rRT-PCR)的引物和探针。选用28株不同NA亚型的流感病毒进行特异性验证,结果显示本文设计的引物探针组合能够特异性检测高致病性H5N8亚型禽流感病毒的NA基因。灵敏度检测结果显示,本文设计的引物探针组合能检出最低23个拷贝的RNA。本文建立了高致病性H5N8亚型禽流感病毒NA基因特异性荧光定量检测方法,与世界卫生组织(WHO)推荐的A型流感病毒M基因、H5基因检测引物探针的最低检测限一致,可以组合用于H5N8亚型禽流感病毒的检测。
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关 键 词: | 流感 A(H5N8) 实时荧光逆转录聚合酶链式反应(Real-time RT-PCR) |
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