基于细胞转基因平台创制抗BmNPV的细胞素材 |
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作者姓名: | 雷雪蛟 田甜 曹明亚 李海清 董战旗 潘敏慧 |
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作者单位: | 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室,重庆北碚,400716;西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室,重庆北碚400716;西南大学农业部家蚕功能基因组和生物学重点实验室,重庆北碚400716 |
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摘 要: | 家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)是影响蚕业生产最为严重的病原之一,每年对我国蚕业生产方面造成很大的经济损失。通过RNA干扰技术(RNAi)干扰BmNPV的增殖关键基因可以有效地抑制病毒的增殖复制。本研究以BmNPV侵染关键基因gp64和lef-1为靶标基因,并利用病毒诱导型启动子LEF3P和39KP共构建了4种RNAi干扰表达载体,分别命名为:piggyBacA3-EGFP-39KP-gp64、piggyBacA3-EGFP-39KP-lef-1、piggyBacA3-EGFP-LEF3P-gp64、piggyBacA3-EGFP-LEF3P-lef-1。经瞬时转染和筛选稳定表达的家蚕细胞系抗病毒检测结果表明,通过RNAi技术能够有效的抑制病毒增殖复制,并确定了39KP启动效果优于LEF3P启动子,干扰gp64基因的抗病毒效果优于lef-1基因。这些研究结果为后期转基因品系培育和家蚕抗病毒研究提供了基础。
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关 键 词: | RNA干扰 BmNPV 转基因 gp64 lef-1 39KP |
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