同型半胱氨酸对心肌细胞的损伤作用及其信号转导机制探讨

目的：观察同型半胱氨酸（homocysteine,HCY)对心肌细胞的损伤作用,探讨该作用发生的信号转导机制及其关键调控环节。方法：分离培养Wistar乳鼠心肌细胞,经HCY作用后,以台盼蓝排斥实验测定细胞存活率,TUNEL法和流式细胞仪测定细胞凋亡率,免疫印迹法测定心肌细胞ERK2蛋白磷酸化水平,阻滞电泳法测定细胞NF－κB活化水平。结果：作用后,心肌细胞存活率显著降低,存活率降低程度与HCY的作用浓度、作用时间具有明确的剂量－效应关系及时间－效应关系;在10^-3mol/L HCY作用下,心肌细胞凋亡率升高,于4h达峰值,为7．56％;10^-3,10^-4、10^-5mol/L HCY均可抑制心肌细胞ERK2磷酸化,其中10^-3mol/L HCY作用于心肌细胞后,ERYK2蛋白磷酸化水平呈现迅速而明显的降低,4h降至对照组的3．04％（P＜0．01）;不同浓度HCY均明显阻抑NF－κB的活化。结论：HCY具有明显心肌细胞损伤作用,对心肌细胞凋亡的诱导是HCY心肌细胞损伤作用的形式之一;HCY可影响心肌细胞信号转导通路ERK,通过对转录因子NF－κB的活化抑制,导致心肌细胞损伤。

Effect of homocysteine on injury of cardiomyocytes and its signal transduction mechanism