首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
   检索      

罗汉果SgHMGR基因的克隆、分析及原核表达
引用本文:赵 欢,莫长明,唐 其,白隆华,马小军.罗汉果SgHMGR基因的克隆、分析及原核表达[J].广西植物,2015,35(6):796-801.
作者姓名:赵 欢  莫长明  唐 其  白隆华  马小军
作者单位:1. 中国医学科学院 北京协和医学院 药用植物研究所, 北京 100193; 2. 广西药用植物园, 南宁 530023; 3. 湖南农业大学 园艺园林学院, 长沙 410128
基金项目:收稿日期: 2014-07-13修回日期: 2014-12-16
基金项目: 国家自然基金面上项目(81373914); 广西自然科学基金青年基金(2011GXNSFB018088)。
作者简介: 赵欢(1986-),女,河北行唐人,博士研究生,主要从事罗汉果分子生物学研究,(E-mail)53522722@163.com。*通讯作者: 马小军,研究员,主要从事药用植物分子育种研究,(E-mail)mayixuan10@163.com。
摘    要:罗汉果甜苷V是一种葫芦烷型四环三萜类物质,作为主要的活性成分和甜味成分存在于成熟果实中,3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)作为萜类化合物生物合成途径中的第一个限速酶,位于甲羟戊酸(MVA)途径中,是罗汉果甜苷V生物合成途径中的重要调控位点。为了深入了解罗汉果甜苷Ⅴ的生物合成途径,该研究从罗汉果转录组数据中获得一条编码HMGR的unigene,以授粉后3 d的幼果作为实验材料,通过RACE技术获得了1 926 bp的全长序列,经过生物信息学软件分析,发现该基因含有1 749 bp的开放阅读框,编码582氨基酸残基,含2段跨膜区,分别位于50~72 aa和93~115 aa,亚细胞定位预测位于质膜或内质网上,预测该蛋白没有信号肽,系统进化树分析显示与同科植物黄瓜和甜瓜中HMGR基因的同源性最高。该研究采取去掉N端跨膜区的方法,构建原核表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导在上清和沉淀中均有融合蛋白出现,尤其在25℃诱导过夜后上清中表达最明显。该文是首次对SgHMGR基因全长序列的克隆及原核表达的功能验证,为进一步深化SgHMGR基因在罗汉果甜苷V生物合成途径中的功能及分子调控研究打下基础。

关 键 词:罗汉果    3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶    克隆    原核表达

Cloning,bioinformatics analysis and prokaryotic expression of SgHMGR in Siraitia grosvenorii
ZHAO Huan,MO Chang-Ming,TANG Qi,BAI Long-Hu,MA Xiao-Jun.Cloning,bioinformatics analysis and prokaryotic expression of SgHMGR in Siraitia grosvenorii[J].Guihaia,2015,35(6):796-801.
Authors:ZHAO Huan  MO Chang-Ming  TANG Qi  BAI Long-Hu  MA Xiao-Jun
Institution:1. Institute of Medicinal Plant Development of Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing 100193, China; 2. Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plants, Nanning 530023, China; 3. College of Horticulture & Landscape, Hunan Agriculture University, Changsha 410128, China
Abstract:
Keywords:Siraitia grosvenorii  HMG-CoA Reductase  cloning  prokaryotic expression
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
点击此处可从《广西植物》浏览原始摘要信息
点击此处可从《广西植物》下载免费的PDF全文
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号