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甘蓝型油菜羧基转移酶α亚基全长cDNA的克隆及在大肠杆菌中表达
引用本文:武玉永,马立新,蒋思婧. 甘蓝型油菜羧基转移酶α亚基全长cDNA的克隆及在大肠杆菌中表达[J]. 生物化学与生物物理进展, 2004, 31(9): 847-854
作者姓名:武玉永  马立新  蒋思婧
作者单位:湖北大学生命科学学院,分子微生物学与基因工程研究室,武汉,430062
基金项目:湖北省自然科学基金(2003ABA118)和国家高技术“863”计划资助项目(2002AA227011).
摘    要:通过分析拟南芥与大豆的羧基转移酶α亚基的cDNA序列,运用RT-PCR、RACE和基因组步行(Genome walking)三种技术进行组合克隆,首次从油菜开花后20~29天的幼胚中,克隆到质体定位的羧基转移酶α亚基的全长cDNA.同源性分析表明,其开放阅读框(ORF)编码的氨基酸序列与拟南芥、大豆的羧基转移酶α亚基的同源性分别为85%、59%.将此cDNA去除叶绿体转运肽编码序列的成熟肽编码序列,克隆到表达载体pHBM625上,蛋白质印迹分析,它在大肠杆菌中成功表达.

关 键 词:甘蓝型油菜,羧基转移酶α亚基,组合克隆,基因表达
收稿时间:2004-03-11
修稿时间:2004-04-29

Cloning of The Full Length cDNA of Carboxyltransferase Alpha Subunit From Brassica napus and Its Expression in Escherichia coli
WU Yu-Yong,MA Li-Xin and JIANG Si-Jing. Cloning of The Full Length cDNA of Carboxyltransferase Alpha Subunit From Brassica napus and Its Expression in Escherichia coli[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 2004, 31(9): 847-854
Authors:WU Yu-Yong  MA Li-Xin  JIANG Si-Jing
Abstract:
Keywords:Brassica napus   carboxyltransferase alpha subunit   combinatorial cloning   gene expression
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