| 温和过甲酸氧化辅助酶解结合液质联用技术鉴定大鼠大脑皮层质膜蛋白质 |
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| 引用本文： | 曹锐,宋琴,陈平,梁宋平,王贤纯.温和过甲酸氧化辅助酶解结合液质联用技术鉴定大鼠大脑皮层质膜蛋白质[J].生命科学研究,2011,15(3). |
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| 作者姓名： | 曹锐 宋琴 陈平 梁宋平 王贤纯 |
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| 作者单位： | 湖南师范大学生命科学学院,中国湖南长沙,410081 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，湖南师范大学青年教师基金资助项目 |
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| 摘 要： | 由于膜蛋白质尤其是内在膜蛋白的强疏水性,分析和鉴定质膜蛋白质仍然是以质谱为基础的蛋白质组学的方法中的一个难点.过甲酸氧化是一种应用广泛的打开二硫键的方法,温和的过甲酸试剂能完全的将半胱氨酸转化为半胱磺酸,将甲硫氨酸转化为甲硫氨酸砜,从而使目的蛋白更易溶于水介质.采用蔗糖密度梯度离心法纯化得到大鼠大脑皮层质膜,提取的质膜蛋白质经温和过甲酸氧化处理后经胰酶酶解消化得到肽段,利用LC-MS/MS对所得肽段进行质谱分析,采集的原始数据用Mascot软件进行库搜寻鉴定.此方法是研究质膜蛋白质的新方法,温和过甲酸氧化显示出很好的氧化效果却避免其它不利于鉴定的副反应.从大鼠大脑皮层膜提取物共鉴定出220种蛋白质,其中73种为整合膜蛋白,证明对质膜蛋白质直接进行温和过甲酸氧化然后酶解的方法辅助酶解可以有效的鉴定质膜蛋白质.
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| 关 键 词： | 温和过甲酸氧化 串联质谱 膜蛋白 蛋白质组学 |
Analysis of the Rat Cerebral Cortex Plasma Membrane Proteins by Mild Performic Acid Oxidation-assisted Digestion Coupled to LC-MS/MS |
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| CAO Rui,SONG Qin,CHEN Ping,LIANG Song-ping,WANG Xian-chun.Analysis of the Rat Cerebral Cortex Plasma Membrane Proteins by Mild Performic Acid Oxidation-assisted Digestion Coupled to LC-MS/MS[J].Life Science Research,2011,15(3). |
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| Authors: | CAO Rui SONG Qin CHEN Ping LIANG Song-ping WANG Xian-chun |
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| Institution: | CAO Rui,SONG Qin,CHEN Ping,LIANG Song-ping,WANG Xian-chun (College of Life Sciences,Hunan Normal University,Changsha 410081,Hunan,China) |
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| Abstract: | The low abundance and the hydrophobic nature of their transmembrane domains make them diffi-cult to analyze.Mild performic oxidation was explored as a method for sample pretreatment in membrane proteomic.Performic acid oxidation,a well-known method for cleave the disulfide bond can oxidizes methio-nine to methionine sulphone and cysteine to cysteic acid and make the oxidized protein more hydrophilic.The purified rat cerebral cortex plasma membrane proteins were oxidized by mild performic acid directly befor... |
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| Keywords: | mild performic acid oxidation tandem mass spectrometry membrane proteins proteomics |
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