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水稻单粒种子DNA提取及RAPD程序的优化研究结果
引用本文:秦春圃.水稻单粒种子DNA提取及RAPD程序的优化研究结果[J].生物技术通报,2005(4):81-81.
作者姓名:秦春圃
摘    要:浙江大学农业与生物技术学院彭锁堂等4位先生,用水稻单粒干种子作材料,进行DNA提取方法和RAPD程序优化研究,结果表明,用CTAB法微量提取水稻干种子DNA,可获得理想的扩增结果,其最佳的反应体系和条件是随机引物浓度100~400μg/L、Mg^2+浓度2~4mmol/L、dNTPs浓度100~400μmol/L、Taq酶IU。变性94 30S,退火38℃ 30S,延伸72℃ 1min,40个循环;若要节省时间和成本,可不进行预变性处理,其反应体积可降至12.5μl,扩增效果仍与前者一样。这是由于RAPD技术在广泛应用中稳定性差、重复性不好、伪阳性多,而PCR在反应中变性、退火、延伸温度、费时,反应过程有循环数,反应体系中有多种试剂来源,

关 键 词:水稻单粒种子  DNA提取  RAPD程序  优化研究  生物技术
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