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多酶恒温扩增核酸试纸条法快速检测肺炎支原体方法的建立及应用
引用本文:胡茜盼,翁兴墉,吕芷贤,蒋婷清,何军,邓仲良.多酶恒温扩增核酸试纸条法快速检测肺炎支原体方法的建立及应用[J].微生物学通报,2023,50(7):3049-3057.
作者姓名:胡茜盼  翁兴墉  吕芷贤  蒋婷清  何军  邓仲良
作者单位:南华大学衡阳医学院公共卫生学院卫生检验与检疫系, 湖南 衡阳 421001;南华大学衡阳医学院附属南华医院检验科, 湖南 衡阳 421001
基金项目:湖南省教育厅重点项目(21A0261);湖南省自然科学基金(2022JJ30501);湖南省卫生健康委员会科研重点课题(20201915)
摘    要:【背景】肺炎支原体是导致儿童和青少年呼吸道感染的重要病原体,长期以来由于其临床表现不特异而容易错过最佳治疗时期。【目的】结合多酶恒温扩增(multienzyme isothermal rapid amplification,MIRA)技术和核酸试纸条建立一种快速检测肺炎支原体的方法。【方法】以肺炎支原体社区获得性肺炎呼吸窘迫综合征(community acquired respiratory distress syndrome, CARDS)毒素编码基因为靶基因设计引物和探针,对反应体系的温度、时间等进行优化,评估其敏感性,通过检测肺炎支原体和其余7种病原体分析其特异性,并对35份临床样本进行验证。【结果】MIRA核酸试纸条法在37℃条件下,15 min内便可完成对肺炎支原体的检测,最低检出限为10 copies/μL;除肺炎支原体外,其余7种病原体均不能扩增,特异性较好。以实时荧光PCR检测为标准,MIRA核酸试纸条法对35份临床样本检测后的诊断特异度为100.00%、灵敏度为96.15%、阴性预测值为90.00%、阳性预测值为100.00%。【结论】本研究建立了MIRA核酸试纸条法...

关 键 词:多酶恒温扩增技术  核酸试纸条  肺炎支原体
收稿时间:2022/9/24 0:00:00

Establishment and application of multienzyme isothermal rapid amplification (MIRA) nucleic acid test strip method for rapid detection of Mycoplasma pneumoniae
HU Xipan,WENG Xingyong,LÜ Zhixian,JIANG Tingqing,HE Jun,DENG Zhongliang.Establishment and application of multienzyme isothermal rapid amplification (MIRA) nucleic acid test strip method for rapid detection of Mycoplasma pneumoniae[J].Microbiology,2023,50(7):3049-3057.
Authors:HU Xipan  WENG Xingyong  LÜ Zhixian  JIANG Tingqing  HE Jun  DENG Zhongliang
Institution:Department of Health Inspection and Quarantine, School of Public Health, Hengyang Medical School, University of South China, Hengyang 421001, Hunan, China;Department of Clinical Laboratory, the Affiliated Nanhua Hospital, Hengyang Medical School, University of South China, Hengyang 421001, Hunan, China
Abstract:
Keywords:multienzyme isothermal rapid amplification (MIRA)  nucleic acid test strip  Mycoplasma pneumoniae
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