| 一种简便快速的聚合酶活性实时检测新方法 |
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| 引用本文： | 栾瑞波,孟祥贤,羊小海,王柯敏,谭蔚泓,郭秋平.一种简便快速的聚合酶活性实时检测新方法[J].生命科学研究,2006,10(2):113-117. |
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| 作者姓名： | 栾瑞波 孟祥贤 羊小海 王柯敏 谭蔚泓 郭秋平 |
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| 作者单位： | 湖南大学,化学生物传感与计量学国家重点实验室,化学化工学院,生命科学与技术研究院,湖南省生物纳米工程技术研究中心,中国,湖南,长沙,410082 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划项目(2002CB513110，2004CB520804)，科技部国际合作重点项目(2003DF000039)，国家科技攻关计划项目(2003BA310A16)，国家自然科学基金资助项目(20475015，20505007)，湖南省科技厅重点资助项目(02JEY2004，0399Y1006) |
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| 摘 要： | 基于双链DNA结合染料能特异嵌入双链DNA发出荧光的原理,发展了一种实时检测DNA聚合酶活性的简便方法.在检测过程中,聚合酶的聚合反应进程被实时转换为荧光信号,通过监测荧光强度的变化实时检测聚合酶的活性及药物对聚合酶活性的影响.该方法不需要对DNA进行放射性同位素标记和荧光标记,也不需要聚丙烯酰胺凝胶电泳和聚合酶链式反应,是一种简便、快速的聚合酶活性实时检测新方法,为研究抗肿瘤药物对聚合酶活性的影响提供了一种简捷方法,也将为相关疾病诊治和药物筛选提供一种新的思路.
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| 关 键 词： | 聚合酶 双链DNA结合染料 实时监测 活性 |
| 文章编号： | 1007-7847(2006)02-0113-05 |
| 收稿时间： | 2006-02-25 |
| 修稿时间： | 2006-05-15 |
A New Simple and Rapid Method for Real-time Polymerase Assay |
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| LUAN Rui-bo,MENG Xiang-xian,YANG Xiao-hai,WANG Ke-min,TAN Wei-hong,GUO Qiu-ping.A New Simple and Rapid Method for Real-time Polymerase Assay[J].Life Science Research,2006,10(2):113-117. |
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| Authors: | LUAN Rui-bo MENG Xiang-xian YANG Xiao-hai WANG Ke-min TAN Wei-hong GUO Qiu-ping |
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| Abstract: | Traditionally,polymerase is assayed by denaturing gel electrophoresis and autoradiography,which are complex and discontinuous. Based on the fact that the dye SYBR Green I can intercalate double-stranded DNA to emit fluorescence,we report a new fluorescence-based DNA polymerase assay that can translate the polymerization process into a fluorescent signal in real-time. Comparatively,the method is simple,convenient,less time consuming and inexpensive without the need of gel electrophoresis,radial labeling,fluorescent labeling and polymerase chain reaction (PCR). Based on this assay,the influence of anti-tumour drugs on the activity of DNA polymerase is investigated. This method will provide a potential in diagnosis and therapy of disease and selecting drugs. |
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| Keywords: | polymerase double-stranded DNA intercalating dye real-time monitoring activity |
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