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c-Myc对诱导性多能干细胞的诱导效率及全能性影响的研究
引用本文:魏小元,徐雍羽,王敏,张儒. c-Myc对诱导性多能干细胞的诱导效率及全能性影响的研究[J]. 细胞生物学杂志, 2014, 0(4): 430-437
作者姓名:魏小元  徐雍羽  王敏  张儒
作者单位:上海市信号转导与疾病研究重点实验室,同济大学生命科学与技术学院,上海200092
基金项目:国家自然科学基金(批准号:31071227)资助的课题
摘    要:该研究探讨转录因子c—Myc对多能诱导干细胞(inducedpluripotentstemcells,iPS)诱导效率及形成的iPS克隆全能性的影响。将Yam,dnaka四因子(Oct4、Sox2、Klf4和C—Myc,OSKM)和不舍C。Myc的三因子(OSK)病毒分别感染OG2小鼠成纤维细胞(mouseembryofibroblast,MEF),诱导成为iPSN胞,通过计数iPS克隆形成数目和流式细胞仪分析iPS克隆的绿色荧光蛋白(GFP)阳性比例。比较OSKM和OSK诱导iPS的效率。分别挑取三株OSK和OSKM诱导的iPS克隆,采用荧光定量PCR法、碱性磷酸酶fAP)染色法和免疫荧光法检测iPS克隆的干性相关蛋白的表达;采用畸胎瘤实验、嵌合体形成实验和四倍体补偿实验检测iPS克隆的全能性。结果显示:在该实验室诱导体系里,OSK病毒感染MEF后形成的iPS克隆数目明显增多,GFP阳性克隆的比例增加。OSK和OSKM诱导iPS克隆的干细胞基本特征,包括形态、AP染色、干细胞特异性基因表达、三胚层形成均没有明显差异。然而,OSK诱导iPS克隆在形成嵌合体小鼠的全能性评估实验中的阳性比例高于OSKM克隆,且只有OSK克隆株能够获得生殖系传递小鼠和四倍体补偿小鼠。该研究表明,在实验诱导体系里去除C—Myc的三因子OSK诱导iPS的效率显著高于OSKM四因子,且三因子诱导iPS克隆具有更好的全能性。

关 键 词:诱导多能干细胞  c—Myc  嵌合体小鼠  四倍体补偿小鼠

Influence of c-Myc on Induction Efficiency and Pluripotency of Induced Pluripotent Stem Cells
Wei Xiaoyuan,Xu Yongyu,Wang Min,Zhang Ru. Influence of c-Myc on Induction Efficiency and Pluripotency of Induced Pluripotent Stem Cells[J]. Chinese Journal of Cell Biology, 2014, 0(4): 430-437
Authors:Wei Xiaoyuan  Xu Yongyu  Wang Min  Zhang Ru
Affiliation:(Shanghai Key Laboratory of Signaling and Disease Research, School of Life Sciences and Technology, Tongji University, Shanghai 200092, China)
Abstract:
Keywords:induced pluripotent stem cells  c-Myc  chimera  tetraploid complementation
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