| 兔Oct4启动子驱动RFP基因表达载体的构建及验证 |
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| 引用本文： | 唐澜,姜伟华,尹明茹,周小梅,李和平,陈学进,李善刚. 兔Oct4启动子驱动RFP基因表达载体的构建及验证[J]. 细胞生物学杂志, 2014, 0(1): 18-25 |
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| 作者姓名： | 唐澜 姜伟华 尹明茹 周小梅 李和平 陈学进 李善刚 |
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| 作者单位： | [1]东北林业大学野生动物资源学院,哈尔滨150040 [2]上海交通大学医学院实验动物科学部,上海200025 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（批准号：81170756、31101048）和上海市自然科学基金项目（批准号：11140901600、11ZRl418800）资助的课题 |
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| 摘 要： | 转录因子OCT4在维持和调控胚胎干细胞的多能性中发挥着重要的作用。Oct4基因启动子驱动标志蛋白的表达对研究胚胎干细胞多能性和建立iPs细胞有重要意义。由于GFP在慢病毒转染过程中常用作转染标记，计划构建兔Oct4基因启动子（rOct4）驱动红色荧光蛋白表达的载体，这将有利于兔ES细胞和iPS细胞制备的研究。通过PCR方法扩增rOct4，构建了rOct4驱动RFP基因的表达载体rOct4-RFP。经转染小鼠ES细胞验证正确后，将rOct4-RFP质粒转染兔成纤维细胞系获得rOct4-RFP成纤维细胞系。经过酶切和测序验证，证明rOct4-RFP构建成功，而且能够在小鼠Es细胞系E14中表达细胞红色荧光蛋白，并受细胞分化状态的调控。通过脂质体介导的基因转移、抗性筛选和PCR鉴定建立了rOct4-RFP转基因成纤维细胞系。
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| 关 键 词： | 兔 rOct4启动子 RFP 干细胞 转基因 |
Construction and Validation of Rabbit Oct4 Promoter-Driven RFP Expression Vector |
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| Tang Lan,Jiang Weihua,Yin Mingru,Zhou Xiaomei,Li Heping,Chen Xuejin,Li Shangang. Construction and Validation of Rabbit Oct4 Promoter-Driven RFP Expression Vector[J]. Chinese Journal of Cell Biology, 2014, 0(1): 18-25 |
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| Authors: | Tang Lan Jiang Weihua Yin Mingru Zhou Xiaomei Li Heping Chen Xuejin Li Shangang |
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| Affiliation: | 1 College of Wildlife Resources, Northeast Forestry University, Harbin 150040, China; 2Department of Laboratory Animal Sciences Shanghai Jiaotong University School of Medicine, Shanghai 200025, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | rabbit rOct4 promoter RFP stem cells transgenosis |
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